8. 切片
切片的*步必需粗切。粗切的厚度大約在50~100微米左右,質(zhì)地較硬的組織或較小的組織應(yīng)再薄一些,粗切致組織全部暴露后,才進(jìn)行細(xì)切。細(xì)切至組織塊表面均勻一致,無(wú)白點(diǎn)后,再把切的蠟片放入溫水中。切片時(shí)要求用力均勻、柔和,搖速不易過(guò)快或過(guò)慢。過(guò)快會(huì)導(dǎo)致切片厚薄不均,機(jī)器磨損;過(guò)慢會(huì)使切片增厚。切片厚度一般為3~5微米。切片的要求是完整、薄、均勻。
切下的片膜其大小形狀應(yīng)與組織塊一致,切片的不完整,常會(huì)將重要病變遺漏,導(dǎo)致誤診、漏診。在切片放蠟塊時(shí),應(yīng)注意組織包埋的方向,組織的層次,纖維、肌肉等的走向應(yīng)與切片刀平行,較難切的部分應(yīng)放在上面,如皮膚的表皮,腫塊的包膜,胃腸道的漿膜等,這樣可以減少組織的斷裂現(xiàn)象。ELISA試劑盒
操作切片機(jī)時(shí)應(yīng)用力均勻,避免用力過(guò)重。對(duì)脫鈣組織、骨髓,以及已知的鈣化組織,應(yīng)選用固定的刀口,以減少其他部位出現(xiàn)缺口的可能性。在使用毛筆展片時(shí)要防止筆絲進(jìn)入刀口,因?yàn)槊壳械揭桓P絲,就會(huì)增加一個(gè)缺口。切片厚度一般為4~6微米,有人認(rèn)為:只要切片機(jī)刻度標(biāo)著幾個(gè)微米,切出來(lái)的片子就是幾個(gè)微米。其實(shí)不然,當(dāng)切片刀不鋒利,或切片時(shí)速度不勻,或切的較慢時(shí),切的片子都會(huì)變厚,只有在切片刀十分鋒利、切片勻速的情況下,才能真正保證其厚度。ELISA試劑盒
下面是切片時(shí)碰到的問(wèn)題及可能處理的方法:(1)組織發(fā)脆:一般是脫水、透明、浸蠟時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、溫度過(guò)高,并與組織本身質(zhì)地也有關(guān),在切片時(shí),邊切邊用嘴向蠟片吹氣,可能會(huì)好些。(2)切片卷起,可能是刀不鋒利,或刀鋒在另一面,或刀角度過(guò)大,切片太厚等等。(3)蠟片彎曲:可能是刀鋒不均,切片刀未磨直,切片刀與蠟塊不平行。(4) 透明、浸蠟時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、溫度過(guò)高,并與組織本身質(zhì)地也有關(guān)(5)厚薄不均:可能是刀、刀座及蠟塊未夾緊,組織太硬,或切片機(jī)主軸太向前,或切片機(jī)已磨損。(6)切片出現(xiàn)裂痕:可能是刀有缺口,石蠟內(nèi)有雜質(zhì),組織內(nèi)有鈣化、骨片或有線結(jié), 也可能會(huì)有棉紙纖維等。(7)切片不連片,切不下片,切片很厚,或者切片后蠟塊發(fā)白,內(nèi)陷:組織脫水不佳。補(bǔ)救辦法:可先將蠟塊溶解,取出組織,放入加熱水浴的丙酮內(nèi)(80℃),30~
60分鐘,再進(jìn)行透明浸蠟包埋切片,也許會(huì)好一點(diǎn)。ELISA試劑盒