有限稀釋法對于篩選雜交瘤來說，是zui普通的方法，在許多實驗室中都在使用。但是，作為相對舊的技術(shù)，已經(jīng)不能滿足當(dāng)今的需求。方法自身具有許多缺點：
1、人工操作，操作及重復(fù)的步驟太多，不可避免容易出錯。
2、速度慢，效率低。只能保證30-40%的孔有細胞生長。對于高通量篩選來說，不能滿足要求。
3、不能保證單克隆，需要亞克隆3-4次，所以，人工和耗時都較多。
4、有限稀釋在ELISA檢測前，并不知道哪一個克隆滿足抗原特異性的要求。所以，需要對所有克隆，都要zui少做一次ELISA鑒定。
除了有限稀釋方法，現(xiàn)在相對先進的細胞分選技術(shù)也得到普遍應(yīng)用。一般就是細胞分選儀或者流失細胞技術(shù)對雜交瘤細胞進行篩選。其原理是先將細胞分散開，沒有細胞結(jié)團。通過在細胞表面或細胞內(nèi)標(biāo)記熒光信號。當(dāng)單個細胞在壓力作用下單個通過玻璃毛細管的時候，儀器可以自動檢測單個細胞的熒光信號強度。熒光信號強度反應(yīng)這個細胞的相應(yīng)抗體表達水平。zui后，將高熒光信號強度的細胞收集，再通過有限稀釋得到高水平表達的單克??；或者也可以使用單細胞收集器收集高水平表達的單個雜交瘤細胞。
