ELISA試劑盒的選擇
醫(yī)藥人員，尤其是各大醫(yī)藥公司的動物模型，臨床實驗的研究人員在實驗設(shè)計中，需要選擇一些有疾病代表性的Biomarker，比如在特定適應(yīng)癥的臨床實驗中的使用率，學術(shù)文章中的發(fā)表情況。如能有效掌握一些大數(shù)據(jù)，將給實驗設(shè)計的合理性提供了保證。
*步：測什么Biomarker？
可以根據(jù)研究文獻的數(shù)量和臨床試驗，比如TNF-a，在以下各大疾病的臨床實驗中，和對應(yīng)文獻中均有使用。當然在炎癥，心血管疾病，糖尿病等疾病中的臨床試驗和使用zui多。
第二步：選什么試劑盒？
以TNF-a為例，Meso Scale Discovery® Vplex電化學發(fā)光試劑盒以0.04pg/mL的靈敏度是普通ELISA（7 pg/mL左右）的100多倍。如果實驗樣本中的TNF-a低于7pg/mL,這就意味著實驗數(shù)據(jù)會無法檢測，實驗沒有定量結(jié)論。另外一個案例，臨床常規(guī)測定普通CRP的方法檢測線性一般為3~200mg/L，而預測心血管事需要更高靈敏度的CRP，超敏或高敏CRP （hs-CRP）。
如需要檢測的是尿液，檸檬酸鹽血漿樣本，需在訂購前仔細查看Elisa試劑盒說明書中的驗證樣本。簡單的說，如果ELISA試劑盒是沒有用過試劑盒檢測尿樣，檸檬酸鹽血漿，使用該試劑盒檢測尿樣會存在極大的風險；而且很多ELISA試劑盒中還會特別說明“不能檢測檸檬酸鹽血漿”。Vplex試劑盒驗證過的樣本有血清， EDTA血漿，肝素血漿，檸檬酸鹽血漿，尿液，細胞上清液。
第三步：檢測什么樣本？試驗周期多長？
如自己采購抗體，開發(fā)ELISA方法學，如遇到抗體親和力低，由于ELISA的兩次洗脫將可能將抗體洗掉，大大影響實驗結(jié)果。Meso Scale Discovery® 可以不用洗，2.5小時完成實驗的一步法。
如實驗研究周期較長，ELISA試劑盒盡量選擇一個批次的，以防止不同批次間的差異。然而由于普通ELISA有效期在3-12個月，而實驗周期往往在1-2年以上，一些長期臨床實驗項目甚至在5-10年，因而經(jīng)常面臨不同批次的挑戰(zhàn)。而Meso Scale Discovery®Vplex試劑盒經(jīng)過54個月穩(wěn)定性測試。使用Vplex，*可以用一個批次支持2-3年的實驗。
