1.TSZelisa試劑盒自行割取大鼠腦組織
2.4℃預(yù)冷的PBS漂去組織血，濾紙吸干殘留的PBS；
3.稱重，加入裂解液勻漿（在冰上）；
4.將得到的勻漿液用液氮反復(fù)凍融3次；
5.室溫靜置30mins，4℃15000r/min離心1h，取上清，分裝，-80℃保存。
TSZelisa試劑盒簡(jiǎn)介：目的建立動(dòng)物組織內(nèi)P53蛋白的免疫檢測(cè)分析方法,為P53生物藥物的代謝分布研究提供檢測(cè)手段。方法辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記抗P53蛋白單克隆抗體3P40,應(yīng)用標(biāo)記后的抗體及重組P53蛋白的檢測(cè),建立競(jìng)爭(zhēng)性ELISA檢測(cè)方法;應(yīng)用此方法建立血清樣品中P53蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線,測(cè)定腹腔注射P53后不同時(shí)間大鼠血清中P53濃度。結(jié)果利用親和層析純化的3P40,進(jìn)行HRP標(biāo)記,ELISA檢測(cè)3P40HRP滴度可達(dá)1∶200 000;建立的競(jìng)爭(zhēng)性ELISA方法可以檢測(cè)PBST中P53蛋白,靈敏度達(dá)30 ng/ml,日內(nèi)精密度較高,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）小于5%,體現(xiàn)較好的重復(fù)性;分別應(yīng)用正常大鼠血清、PBST稀釋的重組P53蛋白樣品進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性ELISA檢測(cè),結(jié)果顯示大鼠血清成分對(duì)P53蛋白檢測(cè)有一定的影響;應(yīng)用血清制備P53蛋白的標(biāo)準(zhǔn)曲線,檢測(cè)了腹腔注射P53蛋白后不同時(shí)間點(diǎn)大鼠血清樣品中的P53蛋白濃度。結(jié)論進(jìn)行了抗P53單克隆抗體3P40的HRP標(biāo)記,建立了競(jìng)爭(zhēng)性ELISA方法,可用于P53蛋白藥物血藥濃度檢測(cè)。TSZelisa試劑盒樣本暫時(shí)不測(cè)應(yīng)在-80°冷凍保存，一般可以放置6個(gè)月左右，-20°可保存3個(gè)月,盡量避免反復(fù)凍融。
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