大鼠ELISA試劑盒對目標蛋白的類似物檢測,具有*的靈敏度和特異性。在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液。測量時先用此孔調(diào),為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或膜,未使用完的試劑,要按照說明書上記錄的方式保存。 大鼠ELISA試劑盒是基于雙位點的雙抗夾心ELISA方法定量檢測樣品中TNF-α(惡病質(zhì)素)的含量。TNF-α(惡病質(zhì)素)特異性的抗體已經(jīng)預包被在細胞培養(yǎng)板上。標準品和樣品中的目標蛋白與固定化的抗體結(jié)合,移除未結(jié)合的底物后,加入目標蛋白特異性的生物素化的檢測抗體,經(jīng)過洗滌,向反應孔中加入鏈霉親和素-HRP偶聯(lián)物。洗滌移除所有未結(jié)合的鏈霉親和素-HRP試劑,加入HRP底物溶液,產(chǎn)生有色產(chǎn)物,顏色的深淺與目標蛋白的的含量成正比。
大鼠ELISA試劑盒使用注意事項:當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。洗滌過程很重要,不充分的洗滌易造成假陽性。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,盡量使用排槍加樣。每次測定的同時要做好標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高,要請經(jīng)過先稀釋后再測定,計算時要最后乘以稀釋倍數(shù)。在配制標準品、檢測溶液工作液時,要用相應的稀釋液配制,不能混淆。底物要避光保存。不能用其它的試劑替換試劑盒中的試劑。