人CD44變體6ELISA檢測(cè)試劑盒洗滌方法：
1. 自動(dòng)洗板機(jī)：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫；試劑或樣品配制時(shí)，均需充分混勻，并盡量避免起泡。
1.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜，37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體，甩干，每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制)，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃溫育1小時(shí)。
3.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時(shí)。
5.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長(zhǎng)，但不可超過(guò)30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí)，即可終止)。
7.每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開(kāi)酶標(biāo)儀電源，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測(cè)程序。
9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HT-29
人巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株；Mo7e
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞；NCI-H157
人前列腺癌細(xì)胞；PC-3 [PC3]
人紅系白血病細(xì)胞；TF-1
人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞；UACC812
人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞；UT-7
人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A-375 [A375]
人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞；BT-474
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；COLO 205
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；COLO 320DM [COLO320DM]
人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞；Daudi
人十二脂腸腺癌；HuTu-80
人鼻咽癌細(xì)胞；CNE-2Z
人胎盤(pán)絨膜癌細(xì)胞；BeWo
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT 116 [HCT116]
人T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞；Jurkat D,E
人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系；Jurkat77
人口腔表皮樣癌細(xì)胞；KB
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；LoVo
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；SW480 [SW 480；SW-480]
急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞；TALL-104
人腎癌細(xì)胞；A498
人宮頸癌細(xì)胞；C-33A
人宮頸癌細(xì)胞；Hela 229 [HeLa229]
人宮頸癌細(xì)胞；Hela P10s-11F
人宮頸癌細(xì)胞；Hela S3 [HeLaS3]
人胰腺腺泡上皮癌；HPAC
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞；HuT 78
人肺鱗癌細(xì)胞；NCI-H520
人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PC-3M IE8
人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PC-3M-2B4
人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PG-BE1
人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PG-LH7
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；SW620 [SW 620；SW-620]
人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤；U-87 MG [U87MG；U87 MG]
人肺癌細(xì)胞；A-427 [A427]
人胰腺癌細(xì)胞；AsPC-1
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞；C918
人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞；Daoy
人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞；HCC38
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞；M619
人胃癌細(xì)胞；MGC-803
綠色熒光蛋白標(biāo)記人胃癌細(xì)胞；MGC803-GFP
人胃癌細(xì)胞；MKN-45
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞；MuM-2B
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