小鼠17羥皮質(zhì)類固醇elisa檢測試劑盒洗滌方法:
1. 自動洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
小鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(mouse TARC)
小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(mouse TAT)
小鼠組織因子(mouse TF)
小鼠組織因子抑制物(mouse TFPI)
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子-β1(mouse TGF-β1)
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子-β2(mouse TGF-β2)
小鼠可溶性粒細(xì)胞靶受體(mouse sTREM-1)
小鼠端粒酶(mouse Telomerase)
小鼠Toll樣受體-2(mouse TLR-2)
小鼠Toll樣受體-4(mouse TLR-4)
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(mouse TIMP-1)
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-2(mouse TIMP-2)
小鼠腫瘤壞死因子-a(mouse TNF-a)
小鼠腫瘤壞死因子-b(mouse TNF-b)
小鼠腫瘤壞死因子-r(mouse TNF-r)
小鼠組織纖溶酶原激活劑(mouse t-PA)
小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白(mouse Transferrin)
小鼠胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(mouse TSLP)
小鼠血栓烷B2(mouse TXB2)
小鼠可溶性腫瘤壞死因子-a受體(mouse sTNF-aR)
小鼠組織多肽抗原(mouse TPA)
小鼠血小板生成素(mouse TPO)
小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(mouse TRAIL/APO 2L)
小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體1(mouse TRAIL R1)
小鼠凝血酶敏感蛋白-1(mouse TSP-1)
小鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(mouse TM)
小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(mouse uPA)
小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(mouse uPA-R)
小鼠血管細(xì)胞粘附分子-1(mouse sVCAM-1)
小鼠血管內(nèi)皮生長因子(mouse VEGF)
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B(mouse VEGF-B)
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子C(mouse VEGF-C)