檸檬酸合酶(CS)測試盒?洗滌方法 |
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點擊次數:717 更新時間:2021-11-24 |
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檸檬酸合酶(CS)測試盒洗滌方法: 1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。 2. 手工洗板:甩盡孔內液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。 實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。 1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。 3.棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。 4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。 5.棄去孔內液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。 6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現明顯梯度時,即可終止)。 7.每孔加終止液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。 8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。 9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。 人腦血管平滑肌細胞 人海馬神經元 人少突膠質細胞 人星形膠質細胞 小鼠成纖維細胞(EGFP標記) mCF, 小鼠心臟成纖維細胞 MN-c, 小鼠皮質神經元 MN-h, 小鼠海馬神經元 MSC, 小鼠雪旺細胞 MA, 小鼠星形膠質細胞 MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞 mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 CSC, 小鼠心肌細胞 mEPC, 小鼠內皮祖細胞-骨髓 MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 NSC,大鼠神經干細胞 RN-h, 大鼠海馬趾神經元 rEPC,大鼠內皮祖細胞-骨髓 RN-c, 大鼠皮質神經元 RN-s, 大鼠紋狀體神經元 RSC, 大鼠雪旺細胞 RA, 大鼠星形膠質細胞 RLF, 大鼠淋巴成纖維細胞 rRTEC, 大鼠腎小管上皮細胞 rCSC, 大鼠心肌細胞 RDFs, 大鼠真皮成纖維細胞 RLFs, 大鼠肺成纖維細胞 rCF, 大鼠心臟成纖維細胞 MN-h, 小鼠海馬神經元 MN-s, 小鼠紋狀體神經元 mOPC, 小鼠少突膠質前體細胞 MA, 小鼠星形膠質細胞 MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞 mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 CSC, 小鼠心肌細胞 小鼠骨髓間充質干細胞(BMSCs) MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 MM, 小鼠小膠質細胞 mCF, 小鼠心臟成纖維細胞 MN-c, 小鼠皮質神經元
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