人窖蛋白(Cav-1)免疫組化試劑盒實驗步驟(建議方案):
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇5min,95%乙醇2 次(每次2min),85%
乙醇2 min;75%乙醇2min,自來水沖洗,ddH2O 洗2×2min;
4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見附1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育30 min;
6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑Tween 20,37℃濕盒孵育封閉20 min;
12.加HRP-SA: 滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20 nM),37℃濕盒中孵育30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應(yīng)用DAB 溶液(試劑F)顯色;
15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
(2NP-AMOZ)呋喃它酮代謝物單克隆抗體
(2NP-SEM)呋喃西林酮代謝物單克隆抗體
(2NP-AHD)呋喃妥因代謝物單克隆抗體
孔雀石綠單克隆抗體
氯霉素單克隆抗體
氟喹諾酮類藥單克隆抗體
恩諾沙星單克隆抗體
環(huán)丙沙星單克隆抗體
沙拉沙星單克隆抗體
氟甲喹單克隆抗體
磺胺類藥物單克隆抗體
磺胺嘧啶單克隆抗體
磺胺二甲基嘧啶單克隆抗體
磺胺二甲氧嘧啶單克隆抗體
磺胺喹噁啉單克隆抗體
磺胺對甲氧嘧啶單克隆抗體
鏈霉素單克隆抗體
四環(huán)素單克隆抗體
金霉素單克隆抗體
土霉素單克隆抗體
強(qiáng)力霉單克隆抗體
新霉素單克隆抗體
卡那霉素單克隆抗體