鵝雌二醇ELISA檢測(cè)試劑盒洗滌方法:
1. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,并盡量避免起泡。
(1).加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
(2).棄去液體,甩干,每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。
(3).棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
(4).每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時(shí)。
(5).棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
(6).每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長(zhǎng),但不可超過(guò)30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí),即可終止)。
(7).每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。
(8).立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開(kāi)酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測(cè)程序。
(9).實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。
小鼠磷脂酶A2(mouse sPLA2)
小鼠Pleiotrophin(mouse Pleiotrophin)
小鼠P53蛋白(mouse P53)
小鼠趨化因子(mouse RANTES)
小鼠抵抗素(mouse Resistin)
小鼠可溶性破骨細(xì)胞異化因子(mouse sRANKL)
小鼠血清淀粉樣蛋白(mouse SAA)
小鼠S-100蛋白(mouse S-100)
小鼠性激素結(jié)合球蛋白(mouse SHBG)
小鼠超氧化物歧化酶(mouse SOD)
小鼠生長(zhǎng)抑素(mouse Somatostatin)
小鼠生長(zhǎng)抑素受體亞型(mouse SSTR2)
小鼠干細(xì)胞生長(zhǎng)因子(mouse SCF)
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(mouse SDF-1)
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1a(mouse SDF-1a)
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1R(mouse SDF-1R)
小鼠可溶性E-選擇素(mouse sE-Selectin/sCD62E)
小鼠可溶性L-選擇素(mouse sL-Selectin/sCD62L)
小鼠可溶性P-選擇素(mouse sP-Selectin/sCD62P)
小鼠P物質(zhì)(mouse Substance P)
小鼠催乳素(mouse PRL)
小鼠孕酮(mouse PROG)
小鼠睪酮(mouse TESTO)
小鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(mouse TARC)
小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(mouse TAT)
小鼠組織因子(mouse TF)
小鼠組織因子抑制物(mouse TFPI)