一、樣品RNA的制備
1、用自選方法抽提病毒樣品RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒RNAout。
2、或柱式病毒RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成cDNA
1.按下表配制RT反應(yīng)體系(20μL體系)。
2.70℃保溫5分鐘變性模板后立即冰浴。
3.嚴(yán)格按順序加入6μLRTBuffer(含dNTP)和2μLMMLV逆轉(zhuǎn)錄酶(含RI)。
反應(yīng)終體積為20μL。
4.42℃保溫60分鐘。此步為RT反應(yīng)。
5.70℃保溫10分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作為PCR模板使用,丌需要純化。
小鼠ELISA試劑盒的產(chǎn)品特點(diǎn):
1、即開(kāi)即用,用戶只需要提供DNA模板。
2、引物經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增巴戟天,與其他植物沒(méi)有交叉反應(yīng)。
3、提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4、PCRmix中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
5、本小鼠ELISA定量試劑盒足夠做40μL體系的PCR50次,但只能用于科研。
小鼠ELISA試劑盒的適用領(lǐng)域:
(1)免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位
(2)研究抗酶抗體的合成
(3)顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)
(4)定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份