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探針法熒光PCR檢測試劑盒的檢驗原理介紹

點擊次數(shù):556 更新時間:2022-06-16
 
  探針法熒光PCR檢測試劑盒的檢驗原理
 
  利用離心柱內硅基質膜提取RNA,在反轉錄酶的作用下,以RNA為模板,以引物為起點合成與RNA模板互補的cDNA鏈。在TaqDNA聚合酶的作用下,經(jīng)高溫變性、低溫退火、中溫延伸的循環(huán),使特異DNA片段的拷貝數(shù)放大一倍。經(jīng)過35次循環(huán),最終使擴增DNA片段放大了數(shù)百萬倍。將擴增DNA片段進行電泳,經(jīng)染色后,在紫外燈照射下,肉眼可見到DNA片段的擴增帶。
 
  探針法熒光PCR檢測試劑盒的樣品處理
 
  1、適用標本類型:發(fā)病動物血液、空腸及小腸腸內容物及組織臟器(腸道組織、腸系膜及淋巴結等)和病毒培養(yǎng)液。
 
  2、標本采集,方法如下:
 
  (1)血清:用一次性注射器取靜脈血2-3ml,轉至5ml的干燥管中,密閉送檢。
 
  (2)腸內容物:無菌條件下取腸道內容物約1g左右,置入1ml含有1.0mlPBS(或生理鹽水)的5ml離心管中,立即送檢。
 
  (3)組織臟器:取發(fā)病動物腸道組織及腸系膜淋巴結等組織約1g,置一1.5ml的潔凈離心管中,密閉送檢。
 
  3、應避免標本間交叉污染。
 
  4、標本收集后可立即檢測;若不能立即檢測,可置于2~8℃冷藏過夜保存;如需長期保存,標本應凍存于-80℃以下,避免反復凍融。
 
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