UACC812細(xì)胞人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞其它注意事項(xiàng):
*,經(jīng)常觀察。*是每天都顯微鏡下看一看,確定細(xì)胞狀態(tài)。然后該換液換,該傳代傳,不用理會(huì)的就原樣放回去。如果好幾天都不想理會(huì),可以放不培養(yǎng)基,或者低血清濃度的培養(yǎng)液,維持細(xì)胞生存,但不增殖。
第二,是否加抗生素。這個(gè)視情況而定。細(xì)胞培養(yǎng)過程中,是要求盡量少添加不相關(guān)的雜質(zhì)。抗生素對(duì)于細(xì)胞來說,也是一種負(fù)擔(dān)。但如果環(huán)境比較污染,直接添加好了。好比沒病不用吃藥,感冒了還是要吃藥;嬰兒沒病但還是要打疫苗。
第三,胎牛血清的解凍。血清一般保存于-20℃,要放在4℃冰箱解凍,耗時(shí)長(zhǎng),500mL要好幾個(gè)小時(shí),我們經(jīng)常是頭天離開實(shí)驗(yàn)室之前放到4℃冰箱,*。所以經(jīng)常分裝成10mL或者20mL。這樣,上午放到4℃冰箱,下午就可以用了。
第二,是否一定要細(xì)胞房。以及是否要嚴(yán)格的遵守種種器具。這個(gè)吧,見仁見智。凡所有種種措施及設(shè)備都是為了保證培養(yǎng)操作過程中無菌,減少感染的機(jī)率;試劑耗材保證無菌無內(nèi)毒素。細(xì)胞房也是這么一個(gè)措施而已,其它試劑耗材也是;我們沒有專門的細(xì)胞房也這么養(yǎng)。
剛開始我們實(shí)驗(yàn)室也是沒有的生物安全柜和細(xì)胞房,拖鞋什么的也沒辦法,沒有加抗生素,照樣養(yǎng)得好好的。但是,交叉養(yǎng),還是需要注意,一是時(shí)間上分隔開來:每天細(xì)胞培養(yǎng)先操作。其它細(xì)菌之類操作靠后,且操作后消毒酒精臺(tái)面消毒,紫外照射1小時(shí)。二是其它操作要小心,避免帶入污染。當(dāng)然,如果有必要加抗生素,還是盡早加,比細(xì)胞污染了再去搶救要來得好。