注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:鮑球狀病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格 英文名稱:Abalone Spherical VirusPCR 編號:HE30563-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒 Acylglycerol Kinase Cyclin-D3 ELISA Kit 細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒 phospho-alpha Adducin(Ser726) Cyclin-D2 ELISA Kit 細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒 ATG16L2 Cyclin-D1 ELISA Kit 細(xì)胞周期素A2(Cyclin-A2)ELISA試劑盒 ACPT Cyclin-A2 ELISA Kit 細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶2(CDK2)ELISA試劑盒 Acid Phosphatase CDK2 ELISA Kit 細(xì)胞周期蛋白A1(CCNA1)ELISA試劑盒 AKIP CCNA1 ELISA Kit 細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)ELISA試劑盒 APOL6 SOCS-3 ELISA Kit 細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)ELISA試劑盒 ARTS SOCS-1 ELISA Kit 細(xì)胞纖維連接蛋白(cFn)ELISA試劑盒 A2LD1 cFn ELISA Kit 細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA試劑盒 A4GNT MEPE ELISA Kit 細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISA試劑盒 AADAC CYP21B ELISA Kit 細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA試劑盒 AADACL4 CYP21A ELISA Kit 細(xì)胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒 AASDHPPT CYP450 ELISA Kit 細(xì)胞色素c氧化酶Ⅵα亞基多肽1(COX6A1)ELISA試劑盒 AASS COX6A1 ELISA Kit 細(xì)胞色素C氧化酶(COX)ELISA試劑盒 ANKRD6 COX ELISA Kit 細(xì)胞色素C-1(CYC1)ELISA試劑盒 Arginase II CYC1 ELISA Kit 細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒 AKR1C3 Cyt-C ELISA Kit 細(xì)胞色素b561(cytb561)ELISA試劑盒 ACTHR cytb561 ELISA Kit 細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(cytovillin/ezrin)ELISA試劑盒 AGRP cytovillin/ezrin ELISA Kit 細(xì)胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(CVL)ELISA試劑盒 Adrenodoxin CVL ELISA Kit 細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA試劑盒 Adracalin SmIg ELISA Kit Aeromonas sobria溫和氣單胞菌PCR試劑盒 Aeromonas spp.氣單胞菌通用PCR試劑盒 Aethina tumida蜂房小甲蟲PCR試劑盒 Afipia spp.阿菲波菌屬通用PCR試劑盒 African Horse Sickness Virus(AHSV)非洲馬瘟病毒RT-PCR試劑盒 African Swine Fever Virus(ASFV)非洲豬瘟病毒PCR試劑盒 Aggregatibacter actinomycetemcomitans 放線共生放線桿菌PCR試劑盒 Ajellomyces capsulate 加州立克次體PCR試劑盒 Akabane Disease Virus(ADV)牛赤羽病病毒RT-PCR試劑盒 Alastrim Virus類天花病毒PCR試劑盒 Alcaligenes faecalis糞產(chǎn)堿桿菌PCR試劑盒 Alcelephine Herpesvirus 1(AlHV-1狷羚皰疹病毒1型PCR試劑盒 Aleutian Disease Virus(ADV)阿留申病病毒PCR試劑盒 Allpaahuayo virus(ALLV)奧爾帕瓦約病毒RT-PCR試劑盒 Alternaria spp.交鏈孢霉屬通用PCR試劑盒 Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒RT-PCR試劑盒 Amidostomum anseri鵝裂口線蟲PCR試劑盒 Amycolaptosis spp.擬無枝菌酸菌通用PCR試劑盒 Amycolata autotrophica自養(yǎng)無枝酸菌PCR試劑盒 Anaplasma centrale 中央無漿體PCR試劑盒 Anaplasma marginale邊緣無漿體PCR試劑盒 Anaplasma phagocytophilum嗜吞噬細(xì)胞無漿體PCR試劑盒 Anaplasma spp.無漿體通用PCR試劑盒 Ancylostoma duodenale十二指腸鉤口線蟲PCR試劑盒 Anisakis spp.異尖線蟲屬PCR試劑盒 Aphanomyces astaci變形絲囊霉菌PCR試劑盒 Aphanomyces invadans侵入性絲囊霉菌PCR試劑盒 Arachnia propionica丙酸蛛網(wǎng)菌PCR試劑盒 Arcanobacterium equi馬隱秘桿菌PCR試劑盒 Arcanobacterium haemolyticum溶血隱秘桿菌PCR試劑盒 Arcobacter spp.弓形桿菌屬通用PCR試劑盒 Arthrinium spp.節(jié)菱孢霉屬通用PCR試劑盒 Arthrobacter equi馬節(jié)桿菌PCR試劑盒 Arthrobacter spp.節(jié)桿菌通用PCR試劑盒 Ascosphaera apis蜜蜂球囊菌PCR試劑盒 Aspergillus flavus黃曲霉PCR試劑盒 Aspergillus fumigatus煙曲霉PCR試劑盒 Aspergillus nidulans構(gòu)巢曲霉PCR試劑盒 Aspergillus ochraceus赭曲霉PCR試劑盒 Aspergillus parasiticus寄生曲霉PCR試劑盒 Aspergillus spp. 曲霉屬通用PCR試劑盒 Astrovirus(AV)星狀病毒RT-PCR試劑盒 Aujeszky's Disease Virus(ADV,同豬皰疹病毒Ⅰ型)奧葉茲基氏病病毒PCR試劑盒 Avian Adenovirus禽腺病毒PCR試劑盒 Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)禽腦脊髓炎病毒RT-PCR試劑盒 Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽戊型肝炎病毒RT-PCR試劑盒 Avian Herpesvirus 1(Gallid Herpesvirus-1、GaHV-1)禽皰疹病毒1型PCR試劑盒 鮑球狀病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格Avian Herpesvirus 2(Gallid Herpesvirus-2、GaHV-2)禽皰疹病毒2型PCR試劑盒 Avian Herpesvirus(Gallid Herpesvirus、GaHV)禽皰疹病毒通用PCR試劑盒 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
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