服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 產(chǎn)品名稱 | 阿菲波菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒 | 英文名稱 | Afipia spp.PCR | 貨號(hào) | HE30591-R |
實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建 ? 特點(diǎn)優(yōu)勢(shì): 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。 5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。 5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。 6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。 8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 腎上腺皮質(zhì)抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定 包裝;5ml 蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:含量≥900μg/mg,純度大于99%,USP32 包裝;1g 腎胺酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 神經(jīng)軸突絲蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;100g 神經(jīng)元凋亡抑制蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;5g 神經(jīng)型一氧化氮合成酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g 神經(jīng)細(xì)胞粘著分子試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%以上,S-構(gòu)型無結(jié)晶 包裝;500g 神經(jīng)特異性烯醇化酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;50MG 神經(jīng)肽Nesfatin-1 elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP30,BR 包裝;25ml 神經(jīng)絲蛋白M試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 神經(jīng)絲蛋白L試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>900μg/mg,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;100g 神經(jīng)絲蛋白H試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,一化合物,BR 包裝;25g 神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 神經(jīng)生長(zhǎng)因子前體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,五合物 包裝;5g 神經(jīng)生長(zhǎng)因子試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g 阿菲波菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒Solobacteriummoorei 中文名稱:Solobacteriummoorei種屬:Solobacteriummoorei分離基物:人類糞便,日本安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:177生長(zhǎng)條件:37℃ 純度:97% Pantoea stewartii subsp. stewartii 中文名稱:斯氏泛菌種屬:Pantoea stewartii subsp. stewartii提供形式:凍干粉安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長(zhǎng)條件:28℃,24-48h,好氧 純度:97% Staphylococcuschromogenes 中文名稱:產(chǎn)色葡萄球菌種屬:Staphylococcuschromogenes分離基物:豬皮安全等級(jí):1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:37℃ 純度:97% Streptomyces hygroscopicus subsp. hygroscopicus 中文名稱:吸鏈霉菌吸亞種種屬:Streptomyces hygroscopicus subsp. hygroscopicus分離基物:復(fù)活島土壤提供形式:凍干粉安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)雷帕霉素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:ISP-2:酵母浸粉4.0g,麥芽浸粉10.0g,葡萄糖4.0g,瓊脂20.0g,pH7.2±0.2。121℃,15min。生長(zhǎng)條件:26℃,好氧 純度:≥95% 安全等級(jí):1 中文名稱:熱紫鏈霉菌安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:158生長(zhǎng)條件:28℃ 純度:≥95% Sporosarcina pasteurii 中文名稱:巴氏生孢八疊球菌種屬:Sporosarcina pasteurii安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:176生長(zhǎng)條件:30℃ 純度:≥95% E. coli S17-1 lpir Stab 中文名稱:大腸桿菌BS-3234種屬:E. coli S17-1 lpir Stab模式菌株:未知 純度:98%,含0.1%碳酸鉀穩(wěn)定劑 Mycobacterium abscessus 中文名稱:膿腫分枝桿菌種屬:Mycobacterium abscessus提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類學(xué)研究,《消毒技術(shù)規(guī)范》規(guī)定的消械對(duì)微生物殺滅效果的檢定評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)菌種?;蚪M測(cè)序菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:改良羅氏培養(yǎng)基::谷氨酸鈉 7.2g,磷酸二氫鉀 2.4g,硫酸鎂 0.24g,檸檬酸鎂 0.6g,甘油 12mL,蒸餾 600mL,馬鈴薯淀粉 30g,全卵液 1000mL,2%孔雀綠 20mL。制備法:各鹽類成分溶解后,加馬鈴薯淀粉,混勻,沸鍋內(nèi)煮沸30~40min(其間不時(shí)搖動(dòng),防凝塊),呈糊狀,待冷后,加入經(jīng)消毒紗布過濾的新鮮全卵液1000mL,混勻。加2%孔雀綠20mL,混勻。生長(zhǎng)條件:30℃,好氧存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98%,含0.1%碳酸鉀穩(wěn)定劑 |