實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建 服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 ? 產(chǎn)品名稱 | 丙酸蛛網(wǎng)菌PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Arachnia propionicaPCR | 貨號(hào) | HE30615-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。 5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。 6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。 8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 特點(diǎn)優(yōu)勢(shì): 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。 5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測定 包裝;1g 可溶性腫瘤壞死因子受體2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%,BR,二合物 包裝;25g 可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:純度>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;5g 可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;250mg 可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;1g 可溶性胸苷激酶1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;1g 可溶性間皮素相關(guān)肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;5g 可溶性核因子κB受體活化因子試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%;ATP競爭性PI3K和mTOR抑制劑 包裝;100g 可溶性淀粉酶前體蛋白α試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;25g 可溶性彈性蛋白片段試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,叔丁胺鹽形式 包裝;5g 可溶性補(bǔ)體激活產(chǎn)物SC5b9 elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP 包裝;100mg 可溶性白介素7受體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25mg 可溶性P選擇素試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;500mg 可溶性O(shè)X40L試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;1g 可溶性Endoglin試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;250mg 可溶性CD86試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 丙酸蛛網(wǎng)菌PCR檢測試劑盒Microbulbifersp. 中文名稱:微泡菌屬種屬:Microbulbifersp.分離基物:紅樹林泥土提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:合成褐藻膠裂解酶。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0444;細(xì)菌用海洋液體培養(yǎng)基:[Bactomarinebroth(DIFCO2216)];酵母膏1.0g,蛋白胨5.0g,F(xiàn)e(III)citrate0.1g,NaCl19.45g,MgCl25.9g,KCl0.55g,Na2SO43.24g,CaCl21.80g,Na2CO30.16g,KBr0.08g,SrCl234.0mg,H3BO322.0mg,NaSiO34.0mg,NaF2.4g,NH4.6mg,Na2HPO48mg,蒸餾1.0L,pH7.6。生長條件:25℃;好氧存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:>98% Ochrobactrumcytisi 中文名稱:金雀兒根瘤蒼白桿菌種屬:Ochrobactrumcytisi分離基物:金雀兒花的根瘤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:分類學(xué)研究,可降解硝酸鹽,解七葉樹素。產(chǎn)β-半乳糖酶和β-葡糖苷酶。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002;營養(yǎng)肉汁瓊脂;蛋白胨5.0g,牛肉浸取物3.0g,NaCl5.0g,瓊脂15.0g,蒸餾1.0L,pH7.0。[注]培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mgMnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:26℃;好氧存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Pseudomonassolanacearum(Smith)Smith 中文名稱:青枯假單胞菌(不提供)種屬:Pseudomonassolanacearum(Smith)Smith安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:馬鈴薯青枯病病源菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:151生長條件:32℃ 純度:98% Fusarium moniliforme Sheldon 中文名稱:串珠鐮孢(斜面)種屬:Fusarium moniliforme Sheldon提供形式:斜面安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:糧食霉腐菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:25-28℃,好氧 純度:98% Mucor circinelloides van Tieghem 中文名稱:卷枝毛霉(斜面)種屬:Mucor circinelloides van Tieghem提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:25-28℃,好氧 純度:97% PenicilliumroquefortiThom 中文名稱:婁地青霉(不提供)種屬:PenicilliumroquefortiThom安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:15生長條件:25-26℃ 純度:97% Coriolus Versicolor (L.:Fr.) Quel 中文名稱:云芝(斜面)種屬:Coriolus Versicolor (L.:Fr.) Quel提供形式:斜面安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:藥用。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:25℃,嚴(yán)格好氧 純度:97% EnterobacteragglomeransEwingandFife 中文名稱:成團(tuán)腸桿菌種屬:EnterobacteragglomeransEwingandFife安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:37℃ 純度:98% |