產(chǎn)品名稱:禽類肉瘤病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格 英文名稱:Avian Sarcoma Virus(ASV)RTPCR 編號:HE30652-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。 ? 反應五要素: 參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 蛋白激酶C試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;5g 蛋白激酶C beta II試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;100g 蛋白激酶B試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;25g 蛋白基因產(chǎn)物9.5試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;500g 蛋白二硫化物異構酶A3試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品 包裝;1g 蛋白S試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;250mg 蛋白C試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,S構型,標準品 包裝;10MG 蛋白ATP1B4試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;25g 蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;5g 蛋白 DJ-1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;5mg 蛋氨酸-R-亞砜還原酶 B2,線粒體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;1ml 彈性蛋白酶2,中性粒細胞試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的ALK抑制劑 包裝;100mg 彈性蛋白酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;25mg 彈性蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;500mg 膽酸試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;1g 膽囊收縮素/縮膽囊素八肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;5g 膽囊收縮素/腸促胰酶肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR 包裝;1g 禽類肉瘤病毒PCR檢測試劑盒規(guī)格 Pseudomonas sp. 中文名稱:脫氮假單胞菌種屬:Pseudomonas sp.提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 10.0 g,牛肉提取物 3.0 g,NaCl 5.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 7.0生長條件:30℃,好氧 純度:99% Paracoccusdenitrificans 中文名稱:脫氮付球菌種屬:Paracoccusdenitrificans安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃ 純度:99% Erwiniapersicina 中文名稱:桃色歐文氏菌種屬:Erwiniapersicina安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:25℃ 純度:≥97% Pseudomonas syringae 中文名稱:丁香假單胞菌種屬:Pseudomonas syringae提供形式:凍干物安全等級:4模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件:26℃,好氧,24-48h,鏡檢為陰性桿菌,純存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:≥97% Agarivoransalbus 中文名稱:白色噬瓊膠菌種屬:Agarivoransalbus提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:細菌用海洋液體培養(yǎng)基:2216E:酵母膏 1.0g,蛋白胨 5.0g,F(xiàn)e(III) citrate 0.1g,NaCl 19.45g,MgCl2 5.9g,KCl 0.55g,Na2SO4 3.24g,CaCl2 1.80g,Na2CO3 0.16g,KBr 0.08g,SrCl2 34.0mg,H3BO3 22.0mg,NaSiO3 4.0mg,NaF 2.4g,NH4NO3 1.6mg,Na2HPO4 8mg,蒸餾 1.0L,pH7.6。121℃,15min。生長條件:25℃,好氧 純度:≥98% Lactobacillus rhamnosus 中文名稱:鼠李糖乳桿菌種屬:Lactobacillus rhamnosus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,硫酸鎂 0.2 g,乙酸鈉 5.0 g,檸檬酸三銨 2.0 g,磷酸氫二鉀 2.0 g,硫酸錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。121℃,15min。生長條件:37℃,微好氧存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:≥98% Halorubrum│saccharovorum 中文名稱:噬糖鹽紅菌種屬:Halorubrum│saccharovorum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:Type strain;培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:212生長條件:37℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97% Streptomycesmorookaense(LocciandSchofield)WittandStackebrandt 中文名稱:師崗鏈霉菌種屬:Streptomycesmorookaense(LocciandSchofield)WittandStackebrandt安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃ 純度:≥99% |