產(chǎn)品名稱：酪丁酸梭菌
貨號(hào)：YS-01J13212
拉丁文: Clostridium tyrobutyricum

提供形式: 凍干管

安全等級(jí): 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)丁酸

培養(yǎng)基: 生孢梭菌培養(yǎng)基：胰蛋白胨 10.0克 牛肉膏 10.0克 葡萄糖 5.0克 氯化鈉 5.0克 酵母膏 3.0克 醋酸鈉 3.0克 可溶性淀粉 1.0克 半胱氨酸 0.5克 瓊脂 0.5克 pH6.8±0.2，蒸餾水 1000ml

強(qiáng)化梭酸培養(yǎng)基，FT

公司產(chǎn)品僅用于科研培養(yǎng)及打管說明：

1、安瓿瓶開封：用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。

3、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后，延遲期較長(zhǎng)，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)

4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營(yíng)養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng)，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

GNRPX/PLEKHJ1  鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白X抗體Cy5標(biāo)記的兔抗大鼠IgM

GnRHR  促性腺激素釋放激素受體抗體PE-Cy3標(biāo)記的兔抗豬IgG

GNPAT  磷酸二羥酮?；D(zhuǎn)移酶抗體APC標(biāo)記的兔抗豬IgG

GNMT  甘氨酸-N-甲基轉(zhuǎn)移酶Cy3標(biāo)記的兔抗豬IgG

GNLY/NKG5  顆粒溶素抗體Cy5標(biāo)記的兔抗豬IgG

GNLY/NKG5  顆粒溶素抗體Cy5.5標(biāo)記的兔抗豬IgG

GNL1  鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白1抗體Cy7標(biāo)記的兔抗豬IgG

GNG2  G蛋白γ2抗體/鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白γ2抗體Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗豬IgG

GNAT3  G蛋白轉(zhuǎn)錄因子α3抗體Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗豬IgG

GNAQ/Gα q  G蛋白α亞單位蛋白Q抗體PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗豬IgG

GNAO1/G0 Protein alpha   G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白O亞基A2抗體堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的兔抗豬IgG

GNAI3  抑制型G蛋白α3抗體FITC標(biāo)記的兔抗豬IgG

GNA12/G protein alpha 12  鳥苷酸調(diào)節(jié)蛋白12抗體羅丹明標(biāo)記的兔抗豬IgG

GMRP1/BTBD10  糖代謝相關(guān)蛋白1抗體Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豬IgG

GM-CSFR β/CSF2RB  粒-巨噬集落激因子受體β抗體Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗豬IgG
酪丁酸梭菌說明書黑曲霉JWA蛋白抗體 Cholesteryl Bromide from Beef Fat 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

釀酒酵母連接蛋白JPH3抗體 Cholesterol Pelargonate 質(zhì)量規(guī)格：>89.0%(GC)

燕麥鐮孢連接粘附分子C抗體 Cholesterol Nonyl Carbonate 質(zhì)量規(guī)格：

釀酒酵母蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗體 Cholesterol Heptyl Carbonate 質(zhì)量規(guī)格：

厚環(huán)乳牛肝菌組蛋白去甲基化酶JMJ2A抗體 Cholesterol Oleyl Carbonate 質(zhì)量規(guī)格：>70.0%(HPLC)

拜耳接合酵母組蛋白去甲基化酶JMJD5抗體 Cholesterol Methyl Carbonate 質(zhì)量規(guī)格：>80.0%(GC)

米根霉磷酸化γ連環(huán)蛋白抗體 Cholesterol Ethyl Carbonate 質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(GC)

多育曲霉JNK相互作用蛋白4抗體 Cholesterol Isopropyl Carbonate 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)
微生物培養(yǎng)方法：

1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。

2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。

上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù)，而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜，對(duì)平板的要求比較高，可參照以下步驟：

a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃，向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿，輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部，待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。

b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。

c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置，用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展，使之分布均勻。