保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 產(chǎn)品名稱:同人皰疹病毒型PCR檢測試劑盒說明書 英文名稱:Human Herpesvirus 4 (HHV4,EB) )4 PCR 編號:HE31093-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。 改良MRS乳酸菌瓊脂培養(yǎng)基/改良MRS瓊脂培養(yǎng)基/MRS Lactotacillus Agar Modified 包裝;25g UBA培養(yǎng)基/UBA Medium 包裝;5g NBB培養(yǎng)基/NBB瓊脂/啤酒有害細(xì)菌檢測瓊脂/NBB Agar 包裝;1g Raka-Ray培養(yǎng)基/乳酸菌選擇性培養(yǎng)基/Raka-Ray Medium 包裝;5g LBS瓊脂/乳酸菌選擇性瓊脂/LBS Agar 包裝;25g M17瓊脂/M17 Agar 包裝;5g M17肉湯/M17 Broth 包裝;1g 乳酸桿菌選擇性瓊脂/Lactobacillus Selective Agar 包裝;250mg APT瓊脂/多功能吐溫瓊脂/APT Agar 包裝;1g 雙歧桿菌BS培養(yǎng)基/BS Medium 包裝;5g BL瓊脂培養(yǎng)基/BL Medium 包裝;1g BBL瓊脂培養(yǎng)基/BBL Medium 包裝;5g TPY瓊脂培養(yǎng)基/TPY Medium 包裝;100g PYG液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)/PYG Broth Base 包裝;25g 皰肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Cooked Meat Medium Base 包裝;5g 7.5%氯化鈉肉湯/7.5% Sodium Chloride Broth 包裝;1g 葡萄球菌選擇性瓊脂基礎(chǔ)/貝爾德-帕克瓊脂基礎(chǔ)/貝爾德-帕克培養(yǎng)基/Baird Parker Agar Base 包裝;5mg 同人皰疹病毒型PCR檢測試劑盒說明書Pseudomonas stutzeri 中文名稱:斯氏假單胞菌種屬:Pseudomonas stutzeri分離基物:人類脊髓液提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:LB生長條件:37℃,好氧,24h,鏡檢為陰性短桿菌,菌種純存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Rhizobium│giardinii 中文名稱:吉氏根瘤菌種屬:Rhizobium│giardinii提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:細(xì)菌肥料用菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:9生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Bacillus│sp. 中文名稱:芽孢桿菌屬種屬:Bacillus│sp.分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)果膠酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:95% Colletotrichum│lagenarium 中文名稱:葫蘆科刺盤孢種屬:Colletotrichum│lagenarium提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:植物寄生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25-28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% Pestalotiopsis│sp. 中文名稱:擬盤多毛孢種屬:Pestalotiopsis│sp.分離基物:植物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:18-26℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Microbacterium testaceum 中文名稱:磚紅色微桿菌種屬:Microbacterium testaceum分離基物:Chinese paddy提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:Type strain培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。生長條件:30℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Bacillu gibsonii 中文名稱:吉氏芽孢桿菌種屬:Bacillu gibsonii提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件:30℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Cupriavidus necator 中文名稱:殺蟲貪銅菌種屬:Cupriavidus necator提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:PHA培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 10.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。121℃,15min。生長條件:30℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% |