特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
Amberli XAD-1180N 非離子型多孔樹脂(粒徑0.350 - 0.600 mm)MTHFD1L (D7O8E) Rabbit mAb基胍碳酸鹽

嘧菌酯（標(biāo)準(zhǔn)品）MTHFD1L (D8T7L) Rabbit mAb氧基酚

雙甲脒標(biāo)準(zhǔn)溶液（10μg/ml,u=4%）AML1 (D33G6) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)DL-泛酰內(nèi)酯

雙甲脒標(biāo)準(zhǔn)溶液（100μg/ml,u=2%）NF-κB2 p100/p52 (18D10) Rabbit mAb (PE Conjuga)3,5-二甲基-氨基酚

威標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.100mg/ml）Notch1 (D6F11) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)四乙基米氏酮

標(biāo)準(zhǔn)溶液（100μg/ml,溶劑：甲）PD-L1 (E1L3N®) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)6-溴-2-巰基并噻唑

標(biāo)準(zhǔn)溶液（100mg/L,溶劑：水）mTOR (7C10) Rabbit mAb (PE Conjuga)2-溴-5-氯

標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,溶劑：甲）DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Alexa Fluor® 488 Conjuga)6-溴-2-甲基-1,并噻唑

標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.989 mg/ml,基體：甲）DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Alexa Fluor® 647 Conjuga)Boc-(2-吡啶基)-L-氨酸

氨標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,溶劑:水）DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Pacific Blue™ Conjuga)地霉素

酰嘧磺?。?biāo)準(zhǔn)品）Atg2A Antibody2,二甲氧基磺酰氯

莠滅凈（標(biāo)準(zhǔn)品）Phospho-Tau (Ser416) (D7U2P) Rabbit mAb5,5-二甲氧基-1,2,3,四氯環(huán)戊二

草毒死（標(biāo)準(zhǔn)品）Phospho-Tau (Ser416) (D7U2P) Rabbit mAb2-氯-6-氟酚

正十六烷標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,基體：甲）Rad54 (D4W3Z) Rabbit mAb3,二氯-6-硝基三氟甲

冰乙酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Animal-Free Blocking Solution (5X)2-戊基吡啶

36%乙酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Animal-Free Blocking Solution (5X)2-氯喹唑啉

冰乙酸（HPLC,≥99.9%）DAPT二乙基二硫

Amberli® IRP-69陽離子交換樹脂Actinomycin D二甲基三硫
唾液彎曲桿菌探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒補(bǔ)體片斷4b(C4b)ELISA試劑盒IL-17F/IL-24  白介素-17F抗體100 ul

補(bǔ)體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒IL-27R/TCCR  白細(xì)胞介素27受體抗體100 ul

補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒IL-18/IGIF  白細(xì)胞介素-18/干擾素γ誘導(dǎo)因子抗體100 ul

補(bǔ)體片段4d(C4d)ELISA試劑盒IL-20  白細(xì)胞介素-20抗體100 ul

補(bǔ)體片段3d(C3d)ELISA試劑盒IL-23  白介素-23抗體100 ul

補(bǔ)體片段3c(C3c)ELISA試劑盒IL-23R  白介素-23受體抗體100 ul

補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒IL-19/NG.1  白細(xì)胞介素-19抗體100 ul

補(bǔ)體蛋白9(C9)ELISA試劑盒IL-20R alpha/IL20RA  白介素20受體α鏈抗體100 ul

補(bǔ)體蛋白5(C5)ELISA試劑盒IL-20RB/IL-20R2  白介素20受體β鏈抗體100 ul