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三線鐮刀菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-11-27
點擊次數(shù):
694
產(chǎn)品特點:
三線鐮刀菌探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次三線鐮刀菌探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

三線鐮刀菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Fusarium tricinctum

貨號

 YSP96744

熒光染料的優(yōu)點:
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
?
熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團,3'端標(biāo)記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點:
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點:
成本高;
設(shè)計難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
硬脂酸(50%)2-二基膦甲

硬脂酸(98%)齊墩果酸

牛蒡苷元(標(biāo)準品)O-乙?;?L-肉鹽酸鹽

牛蒡子苷(標(biāo)準品)8-溴-1-辛

日當(dāng)藥黃素(標(biāo)準品)吲哚-6-甲酸甲酯

?;悄懰徕c(標(biāo)準品)溴-2-三氟酚

牛磺膽酸鈉三氟甲氧基溴芐

諾米林(標(biāo)準品)甲基水楊酸

歐當(dāng)歸內(nèi)酯A(標(biāo)準品)清酸

歐前胡素(標(biāo)準品)beta-胸苷

α-蒎反式-氨基環(huán)己鹽酸鹽

β-蒎(標(biāo)準品)2-氨基-3,5-二溴甲

七葉膽苷XVII(標(biāo)準品)溴-2-(三氟甲氧基)甲酸

七葉皂苷鈉(標(biāo)準品)硫酸沙丁

漆黃素氟比洛芬

漆黃素(標(biāo)準品)S-布洛芬

奇任(標(biāo)準品)聯(lián)酸

千層紙素A(標(biāo)準品)酸
三線鐮刀菌探針法熒光PCR檢測試劑盒載脂蛋白E抗體CDK7/Cyclin H/MAT1 /FITC  熒光素標(biāo)記周期素依賴性激酶7抗體IgG100 ul

甲胎蛋白AFP抗體CDK8/FITC  熒光素標(biāo)記周期素依賴性激酶8抗體IgG100 ul

陰離子交換蛋白2抗體CDK9/FITC  熒光素標(biāo)記周期素依賴性激酶9抗體IgG100 ul

鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體Phospho-CDK9 (Thr186) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗、大、周期素依賴性激酶9抗體IgG100 ul

三酸腺苷酶家族蛋白3A抗體CD133/RBITC  紅色熒光素羅丹明 (RBITC)標(biāo)記兔抗、大、和果蠅CD133抗體IgG100 ul

載脂蛋白J抗體CD46/RBITC  紅色熒光素羅丹明(RBITC)標(biāo)記CD46膜輔蛋白抗體IgG100 ul

載脂蛋白H抗體Cdkn1c/p57/Kip2 /FITC  熒光素標(biāo)記周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體IgG1 Kit

二酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶4抗體Phospho-p57 Kip2 (Thr310)/FITC  熒光素標(biāo)記酸化周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體IgG100 ul

AKIRIN2蛋白抗體CDX2/FITC  熒光素標(biāo)記尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2抗體IgG100 ul

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 三線鐮刀菌 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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