產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱：皮炎芽生菌PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱：Blastomyces dermatitidisPCR
編號(hào)：HE30701-R
類別:PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
?
儲(chǔ)需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
保存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
乳香屬標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BOSWELLIA STANDARDS KIT(SH) 質(zhì)量規(guī)格：D,99.8%+TMS 0.03% 包裝;25g

乳香屬標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BOSWELLIA STANDARDS KIT(SH) 質(zhì)量規(guī)格：D,99.9% 包裝;5g

牛蒡?qū)贅?biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BURDOCK STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：D,99.8%+TMS 0.03% 包裝;5g

牛蒡?qū)贅?biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BURDOCK STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：D,99.9% 包裝;100ml

金雀花標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BUTCHERS BROOM STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：D,99.8%+TMS 0.03% 包裝;25ml

金雀花標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BUTCHERS BROOM STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：D,99.9% 包裝;1g

柴胡皂甙標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BUPLEURUM SAIKOSAPONIN STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：D,99.8%+TMS 0.03% 包裝;25g

黑升麻標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BLACK COHOSH STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：D,99.9% 包裝;5g

黑升麻標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BLACK COHOSH STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：D,99.8% 包裝;1g

酸橙標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BITTER ORANGE (SYNEPHRINE) STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：for HPLC,≥99.0% 包裝;25g

酸橙標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BITTER ORANGE (SYNEPHRINE) STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：for HPLC, ≥99.7% 包裝;5g

柑橘生物類黃酮標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 CITRUS BIOFLAVONOID STANDARDS KIT(SH) 質(zhì)量規(guī)格：for HPLC,≥99.8%(GC) 包裝;1g

柑橘生物類黃酮標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 CITRUS BIOFLAVONOID STANDARDS KIT(SH) 質(zhì)量規(guī)格：for HPLC,≥99.5% 包裝;5g

越桔花青素標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BILBERRY AGLYCONE ANTHOCYANIDINS STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：離子對(duì)色譜用試劑 包裝;1ml

越桔花青素標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BILBERRY AGLYCONE ANTHOCYANIDINS STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑 包裝;5g

越桔花青素標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BILBERRY AGLYCONE ANTHOCYANIDINS STANDARDS KIT(P) 質(zhì)量規(guī)格：用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑 包裝;100g

顛茄標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 BELLADONNA STANDARDS KIT(RG) 質(zhì)量規(guī)格：用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑 包裝;25g
皮炎芽生菌PCR檢測試劑盒說明書Rhizopussp. 中文名稱：根霉屬的菌種屬:Rhizopussp.安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:釀酒培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:17生長條件:28-30℃ 純度：>90%(GC),含100 ppm 對(duì)叔丁基鄰苯二酚穩(wěn)定劑

RhizopusformosensisNakazawa 中文名稱：中國臺(tái)灣根霉種屬:RhizopusformosensisNakazawa安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:糖化菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:17,50生長條件:28-30℃ 純度：98%

RhizopuschinensisSaito 中文名稱：華根霉種屬:RhizopuschinensisSaito安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:糖化菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:15,17生長條件:28-30℃ 純度：98%

Rhzopus arrhizus Fisher 中文名稱：少根根霉種屬:Rhzopus arrhizus Fisher提供形式:凍干粉安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)乳酸培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。生長條件:25-28℃，好氧 純度：97%

Phanerochaetc chrysosporium 中文名稱：白腐菌種屬:Phanerochaetc chrysosporium提供形式:凍干粉安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長條件:28-32℃，好氧 純度：97%

PenicilliumspinulosumThom 中文名稱：小刺青霉種屬:PenicilliumspinulosumThom安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:15生長條件:25-26℃ 純度：95%

PenicilliumpurpurogenumStoll 中文名稱：產(chǎn)紫青霉種屬:PenicilliumpurpurogenumStoll安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:15生長條件:25-26℃ 純度：98%

PenicilliumlilacinumThom 中文名稱：淡紫青霉種屬:PenicilliumlilacinumThom安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:15生長條件:25-26℃ 純度：98%
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
技術(shù)原理：
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。