特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途! 產(chǎn)品名稱 | 瘰疬分枝桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Mycobacterium scrofulaceum | 貨號 | YSP96957 |
熒光染料的優(yōu)點(diǎn): 產(chǎn)品僅用于科研使用簡便; 可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合; 價格便宜; 熒光染料的缺點(diǎn): 不能區(qū)分不同的雙鏈DNA 引物二聚體會影響檢測的敏感性 非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性 引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別,進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。 ? 熒光探針: Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。 正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。 當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。 TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實(shí)驗(yàn)時間。 TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn): 熒光背景低; 敏感性高; 雜交穩(wěn)定性高; 熒光光譜分辨率好; 特異性高。 TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn): 成本高; 設(shè)計(jì)難度大; 只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。 由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。 PCR技術(shù)的定量原理: 擴(kuò)增曲線 在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。 在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。 PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。 ? 熒光定量PCR原理: 產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強(qiáng)度信號,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。 一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。 人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒 英文名稱:Human α-galactosidase,αGAL ELISA Kit進(jìn)口/分裝 人β-促脂素(β-LPH)ELISA試劑盒 英文名稱:Human β-lipotropic hormone,β-LPH ELISA Kit* 人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒英文名稱:Human amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit* 人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒英文名稱:Human amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA Kit 96T* 人β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA試劑盒 英文名稱:Human α mannosidase,α Manase ELISA Kit進(jìn)口/原裝 LN (laminin) 層粘連蛋白(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg Anti-ALK/CD246 間變型淋巴瘤激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml C10orf88 英文名稱: 10號染色體開放閱讀框88抗體 0.2ml Anti-GM-CSFR alpha/CD116 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體α抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml CCK-8(Human cholecystokinin octapeptide) ELISA Kit 人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽Multi-class antibodies規(guī)格: 96T Anti-COX10 細(xì)胞色素c氧化酶10抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml Rhesus antibody Rh MAPKAPK5/PRAK p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激酶抗體 規(guī)格 0.2ml Casp4(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人凋亡相關(guān)半胱酸肽酶4 96T RMND5B 英文名稱: RMND5B蛋白抗體 0.2ml 500克 ER培養(yǎng)基10升Eriksson MediumBR ER培養(yǎng)基(含維生素)10升Eriksson Medium with vitaminsBR MS培養(yǎng)基250克MS Medium用于植物組織培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基 MS培養(yǎng)基(含維生素)10升MS Medium with vitaminsBR Nitsch培養(yǎng)基(含維生素)10升Nitsch Medium with vitaminsBR 瘰疬分枝桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒卷曲螺旋域蛋白質(zhì)85C抗體Phospho-RasGRF1 (Ser916)/FITC 熒光素標(biāo)記酸化Ras特異性鳥嘌呤核苷酸釋放因子1抗體IgG50 ug 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體Rb/P105 RB/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗、大、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤抑癌蛋白抗體IgG100µl 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體RCC1/FITC 熒光素標(biāo)記染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體IgG10 ug 細(xì)胞表面趨化因子受體4抗體Rbms3 proin/FITC 熒光素標(biāo)記Rbms3 proin抗體IgG10 ug CD19抗體Phospho-RCC1 (Ser11) /FITC 熒光素標(biāo)記酸化染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體IgG10 ug 環(huán)氧合酶2/內(nèi)過氧化物合成酶2抗體Reprimo/Rprm/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的糖基化蛋白抗體IgG10 ug 白細(xì)胞分化抗原CD2AP抗體Resistin/FITC 熒光素標(biāo)記抵抗素抗體IgG10 ug CD3/CD3-ε 抗體RelB /FITC 熒光素標(biāo)記核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體IgG10 ug 軟骨糖蛋白39抗體Regucalcin/SMP30/Rgn/FITC 熒光素標(biāo)記衰老標(biāo)記蛋白30抗體IgG100 ul |