特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
鳥嘌呤鹽酸鹽EHMT1 (E6Q8B) Rabbit mAb嘧啶甲酸

鳥嘌呤硫酸鹽SignalSilence® cdc2 siRNA I(S)-1-N-BOC-哌甲酸甲酯

腺嘌呤鹽酸鹽PDI (C81H6) Rabbit mAb嘧啶-2-羧酸

肌苷；次核苷PDI (C81H6) Rabbit mAb2-氟-甲酸

肌苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Cortactin Antibody二并[b,f][1,4]硫氮雜卓-11-[10H]酮

5‘-腺嘌呤核苷酸二鈉鹽(AMP2Na)ATF-2 (D4L2X) XP® Rabbit mAb硝基鄰二甲

5‘-腺嘌呤核苷酸二鈉鹽(AMP2Na)ATF-2 (D4L2X) XP® Rabbit mAb2-氨基嘧啶-5-羧酸

5-溴-2’-脫氧尿苷(BRDU)Cortactin (H222) Antibody(氯甲基)甲酸

胞苷；胞嘧啶核苷TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb環(huán)己基異酸酯

胞嘧啶核苷,胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb(3aR,4S,5R,6aS)-(-)-六氫-(羥甲基)-2-氧代-2H-環(huán)戊并[b]呋喃-5-基 1,1'-聯(lián)-甲酸酯

dATP,三酸脫氧腺苷鈉鹽AUP1 (D5M9Q) Rabbit mAb反式-(1R,2R)-2-氨基環(huán)戊鹽酸鹽

dGTP;三酸脫氧鳥苷鈉鹽Asymmetric-Methyl-PABP1 (Arg455/Arg460) (C60A10) Rabbit mAb二甲氨基-1-

dCTP;三酸脫氧胞苷鈉鹽Phospho-NDRG1 (Ser330) Antibody硅烷偶聯(lián)劑 JH-M902

dTTP;2‘-脫氧胸苷-5’三酸鈉鹽(dTTP)Sav1 AntibodyL-氨

2‘-脫氧尿苷Brg1 (A52) Antibody2-氨基噻吩-甲酸乙酯

β-胸苷(dT);2'-脫氧胸苷Brg1 (A52) Antibody2-溴丁酸甲酯

2’-脫氧鳥苷;2'-dGPhospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb (Sepharose®Bead Conjuga)5,6-二氨基脲嘧啶

2‘-脫氧胞苷Phospho-Connexin 43 (Ser368) Antibody溴-2-三氟甲酸
革蜱探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒SATB1  核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體20 ul

骨特異性性酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒Phospho-SATB1 (Ser47)  酸化核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體100 ul

骨特性性酸酶C端肽ELISA試劑盒SCF  干細(xì)胞生長因子抗體100 ul

骨橋素(OPN)ELISA試劑盒SCG3/SgIII  分泌粒蛋白3抗體100 ul

骨性酸酶(BALP)ELISA試劑盒SCN1A  SCN1A抗體100 ul

骨鈣素(OT)ELISA試劑盒SCN2A  SCN2A抗體20 ul

骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒SCN9A/NAV1.7  電壓開啟的鈉離子通道SCN9A抗體500 ul

骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒SCP2/NLTP  固醇攜帶蛋白2抗體100 ul

骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒SCP3  聯(lián)會(huì)復(fù)合體蛋白3抗體100 ul