服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 產(chǎn)品名稱 | 博茲曼熒光桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 | 英文名稱 | Fluoribacter bozemanaePCR | 貨號(hào) | HE30993-R |
實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建 ? 特點(diǎn)優(yōu)勢(shì): 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。 5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。 5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。 6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。 8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 硫柳汞鈉/乙基汞硫代楊酸鈉/硫柳汞酸鈉/乙汞硫楊酸鈉鹽/乙基噻吩酸鈉鹽/乙汞硫柳酸鈉/Merthiolate sodium 質(zhì)量規(guī)格:D,99.9% 包裝;1g 鈉/疊氮鈉/迭氮鈉/迭氮化鈉/Sodium azide 質(zhì)量規(guī)格:D,99.9% 包裝;250mg 間苯二酚/雷瑣辛/樹脂酚/間二羥基苯/1,3-苯二酚/1,3-二羥基苯/雷鎖酚/Resorinol 質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%, acidity 90% IN D2O 包裝;250mg 2-氨基酚/2-氨基苯酚/鄰氨基苯酚/鄰氨基酚/2-羥基/2-氨基-1-羥基苯/鄰羥基/2-Aminophenol 質(zhì)量規(guī)格:D, 99%, acidity 96-98% IN D2O 包裝;100g 3-氨基酚/間氨基酚/間氨基苯酚/3-羥基/3-氨基-1-羥基苯/3-氨基苯酚/間羥基/毛皮棕EG/烏爾茲EG/3-Aminophenol 質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%, acidity 90% IN D2O 包裝;500g 4-氨基酚/對(duì)氨基酚/4-氨基苯酚/對(duì)氨基苯酚/4-羥基/4-氨基-1-羥基苯/對(duì)羥基/P-氨基苯酚/4-Aminophenol 質(zhì)量規(guī)格:D, 99.5% DCL 20% IN D2O 包裝;1g 重蒸酚/苯酚/羥基苯酚/酚/石炭酸/羥基苯/工業(yè)酚/石碳酸/Phenol 質(zhì)量規(guī)格:D, 99.5% DCL 35% IN D2O 包裝;5g 飽和酚/平衡酚/Phenol Water 質(zhì)量規(guī)格:D, 99.5% DCL 20% IN D2O 包裝;1g Tris-飽和酚/Tris平衡苯酚/Tris平衡酚/Tris-Phenol 質(zhì)量規(guī)格:D, 99.5% DCL 35% IN D2O 包裝;1g 三季銨酚/加拉銨/2-[2,6-雙(2-三乙基銨乙氧基)苯氧基]乙基三乙基銨三化物/馳肌/化浸酚銨/Gallamine triethiodide 質(zhì)量規(guī)格:D, 99.5% DCL 20% IN D2O 包裝;25g 3,5-二羥基甲苯/合5-甲基間苯二酚/3,5-甲苯二酚/甲基樹脂酚/苔黑酚/苔黑素/5-甲基間苯二酚/俄耳辛/衣酚/地衣酚/3,5-二羥基甲苯一物/5-甲基-1,3-苯二酚/臺(tái)黑酚/3,5-Dihydroxytoluene 質(zhì)量規(guī)格:D, 99.5% DCL 35% IN D2O 包裝;5g 對(duì)苯二酚/氫醌/1,4-二羥基苯/幾奴尼/海得/1,4-苯二酚/雞納酚/孔奴尼/羥基苯酚/Hydroquinone 質(zhì)量規(guī)格:D,99% 包裝;100g 4-乙酰氨基酚/對(duì)乙酰氨基酚/對(duì)乙酰氨基苯酚/撲熱息痛/N-乙酰對(duì)氨基酚/對(duì)羥基乙酰/N-(4-羥基苯基)乙酰胺/醋氨酚/對(duì)羥基苯基乙酰胺/APAP 質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%+0.05%TMS 包裝;25g 香芹酚/香荊芥酚/異丙基甲苯酚/羥基異丙基甲苯/香旱芹菜酚/香旱芹子油酚/異丙基鄰甲酚/2-甲基-5-異丙基-1-苯酚/5-異丙基-2-甲基苯酚/2-甲基-5-異丙基苯酚/異百里酚/2-對(duì)傘花酚/2-羥基對(duì)傘花烴/2-羥基對(duì)異丙基甲苯/Carvacrol 質(zhì)量規(guī)格:D,99.5% 包裝;500g 丁香油酚/丁子香酚/丁香酚/丁子香酸/4-烯丙基-2-甲氧基苯酚/2-甲氧基-4-烯丙基酚/4-烯丙基愈瘡木酚/2-甲氧基-4-(2-基)苯酚/2-甲氧基-4-基苯基苯/烯丙基甲氧基苯酚/異丁香酚苯/Eugenol 質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%+0.03%TMS 包裝;1g 2-甲氧基酚/愈創(chuàng)木酚/2-甲氧基苯酚/甲基兒茶酚/鄰羥基苯甲醚/鄰甲氧基苯酚/2- Methoxyphenol 質(zhì)量規(guī)格:D,99.5% 包裝;5g 3-甲氧基酚/3-羥基茴香醚/3-甲氧基苯酚/3-羥基苯甲醚/間羥基苯甲醚/間甲氧基酚/間苯二酚一甲醚/1-羥基-3-甲氧基苯/對(duì)甲氧基苯酚/間甲氧基苯酚/間苯二酚單甲醚/3-Methoxyphenol 質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%+0.03%TMS 包裝;500ug 博茲曼熒光桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書Yarrowia│lipolytica 中文名稱:解脂耶羅維亞酵母種屬:Yarrowia│lipolytica分離基物:生物樣/紅海欖/枝提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海酵母培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:513生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:>98.0%(GC) Cryptococcus│aureus 中文名稱:金色隱球酵母種屬:Cryptococcus│aureus分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生物轉(zhuǎn)化微生物/蛋白含量高培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:513生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:>98.0%(GC) Micrococcus│terreus 中文名稱:土微球菌種屬:Micrococcus│terreus分離基物:沉積物/多管沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:未檢測(cè)到果膠酶、酪蛋白酶、纖維素酶、淀粉酶、瓊脂酶,檢測(cè)到過(guò)氧化氫酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:90% Ectothiorhodospira│sp. 中文名稱:外硫紅螺菌種屬:Ectothiorhodospira│sp.分離基物:樣/鹽場(chǎng)表層泥提供形式:其它安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:微生物/耐鹽堿菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:1004生長(zhǎng)條件:25-35℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:90% Vibrio│ponticus 中文名稱:黑海弧菌種屬:Vibrio│ponticus分離基物:樣/海提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:科研參考菌株培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:26℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:90% Vibrio│mediterranei 中文名稱:地中?;【N屬:Vibrio│mediterranei分離基物:沉積物/海洋沉積物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:26℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Phenylobacterium│sp. 中文名稱:苯基桿菌種屬:Phenylobacterium│sp.分離基物:樣/上層海提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:海洋可培養(yǎng)細(xì)菌多樣性研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:511生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Isoptericola│variabilis 中文名稱:變異白蟻菌種屬:Isoptericola│variabilis分離基物:沉積物/重力活塞取樣提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:海洋放線菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%,含 900 ppm MEHQ 穩(wěn)定劑 |