產(chǎn)品名稱:戈爾迪勒病毒PCR檢測試劑盒說明書 英文名稱:Gordil VirusRTPCR 編號:HE31033-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 ? 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 硬脂酸鋇/十八酸鋇/十八烷酸鋇鹽/Barium stearate 質(zhì)量規(guī)格:0.99 包裝;1g 氫氧化鋇/八氫氧化鋇/Barium hydroxide octahydrate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;250mg 硅粉/硅/結(jié)晶硅/多晶硅/工業(yè)硅/金屬硅/Silicon powder 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,96% 包裝;5g 硅粒/硅/結(jié)晶硅/多晶硅/工業(yè)硅/金屬硅/Silicon 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 一氧化硅/氧化硅(II)/氧化亞硅/Silicon monoxide 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 碳化硅/綠色碳化硅/金剛砂/耐火砂/硅碳化物/碳化矽/Silicon carbide 質(zhì)量規(guī)格:1.0 M in toluene 包裝;25g 二氧化硅/硅氧/硅土/硅石/硅酐/石英砂/白炭黑/晶/石英/氧化硅/石英玻璃/熔煉石英/熔融石英/硅砂/透明石英/Silicon dioxide 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 硅油H201-50/苯甲基硅油274/甲基苯基硅油/45%苯基/甲基苯基硅油III/苯基甲基硅油III/聚硅氧烷/二甲聚硅氧烷/有機(jī)硅油/二甲基(硅氧烷與聚硅氧烷)/硅酮/有機(jī)硅樹脂/甲基硅樹脂/聚二甲基硅氧烷/硬泡硅油/Silicone 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 硅油H201-100/苯甲基硅油274/甲基苯基硅油/45%苯基/甲基苯基硅油III/苯基甲基硅油III/聚硅氧烷/二甲聚硅氧烷/有機(jī)硅油/二甲基(硅氧烷與聚硅氧烷)/硅酮/有機(jī)硅樹脂/甲基硅樹脂/聚二甲基硅氧烷/硬泡硅油/Silicone 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;250mg 硅油H201-350/苯甲基硅油274/甲基苯基硅油/45%苯基/甲基苯基硅油III/苯基甲基硅油III/聚硅氧烷/二甲聚硅氧烷/有機(jī)硅油/二甲基(硅氧烷與聚硅氧烷)/硅酮/有機(jī)硅樹脂/甲基硅樹脂/聚二甲基硅氧烷/硬泡硅油/Silicone 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2% 包裝;5g 硅油H201-500/苯甲基硅油274/甲基苯基硅油/45%苯基/甲基苯基硅油III/苯基甲基硅油III/聚硅氧烷/二甲聚硅氧烷/有機(jī)硅油/二甲基(硅氧烷與聚硅氧烷)/硅酮/有機(jī)硅樹脂/甲基硅樹脂/聚二甲基硅氧烷/硬泡硅油/Silicone 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2% 包裝;1g 硅油H201-1000/苯甲基硅油274/甲基苯基硅油/45%苯基/甲基苯基硅油III/苯基甲基硅油III/聚硅氧烷/二甲聚硅氧烷/有機(jī)硅油/二甲基(硅氧烷與聚硅氧烷)/硅酮/有機(jī)硅樹脂/甲基硅樹脂/聚二甲基硅氧烷/硬泡硅油/Silicone 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3% 包裝;250mg 硅油I/苯甲基硅油255/甲基苯基硅油/23%~25%苯基/甲基苯基硅油I/苯基甲基硅油I/聚硅氧烷/二甲聚硅氧烷/有機(jī)硅油/二甲基(硅氧烷與聚硅氧烷)/硅酮/有機(jī)硅樹脂/甲基硅樹脂/聚二甲基硅氧烷/硬泡硅油/Silicone 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 硅油Ⅱ/苯甲基硅油250/甲基苯基硅油/17%~19%苯基/甲基苯基硅油II/苯基甲基硅油II/DC510/聚硅氧烷/二甲聚硅氧烷/有機(jī)硅油/二甲基(硅氧烷與聚硅氧烷)/硅酮/有機(jī)硅樹脂/甲基硅樹脂/聚二甲基硅氧烷/硬泡硅油/Silicone 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98% 包裝;5g 硅油Ⅲ/苯甲基硅油274/甲基苯基硅油/45%苯基/甲基苯基硅油III/苯基甲基硅油III/聚硅氧烷/二甲聚硅氧烷/有機(jī)硅油/二甲基(硅氧烷與聚硅氧烷)/硅酮/有機(jī)硅樹脂/甲基硅樹脂/聚二甲基硅氧烷/硬泡硅油/Silicone 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8% 包裝;1g 甲基硅油/二甲基硅油/硅油/聚硅氧烷/二甲聚硅氧烷/有機(jī)硅油/二甲基(硅氧烷與聚硅氧烷)/硅酮/有機(jī)硅樹脂/甲基硅樹脂/聚二甲基硅氧烷/硬泡硅油/Dimethylsilicone fluid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,pestizides≤1 ppm 包裝;250mg 甲基硅油DC200/硅酮OV-101/二甲基硅油/甲基硅油/二甲基硅酮液/聚硅氧烷DC-200/硅酮DC-200/甲基硅氧烷/聚二甲基硅氧烷/二甲基(硅氧烷與聚硅氧烷)/硅酮/有機(jī)硅樹脂/甲基硅樹脂/硬泡硅油/Dimethylsilicone fluid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 戈爾迪勒病毒PCR檢測試劑盒說明書Marinobacterium│georgiense 中文名稱:喬治亞海桿菌種屬:Marinobacterium│georgiense分離基物:沉積物/TVG淺黃色鈣質(zhì)軟泥提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的生物轉(zhuǎn)化微生物/分離自含硫代硫酸鈉培養(yǎng)基:(硫氧化微生物)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% Marinovum│algicola 中文名稱:棲藻海卵菌種屬:Marinovum│algicola分離基物:樣/多管上覆提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:大洋細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Bacillus│badius 中文名稱:栗褐芽孢桿菌種屬:Bacillus│badius分離基物:沉積物/深灰色沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)淀粉酶菌株培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:15℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Colwellia│aestuarii 中文名稱:河口科爾韋爾氏菌種屬:Colwellia│aestuarii分離基物:沉積物/深灰色沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)蛋白酶、淀粉酶菌株培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:15℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% Cellulosimicrobium│funkei 中文名稱:芬克纖維微菌種屬:Cellulosimicrobium│funkei分離基物:生物樣/赤棕魚/魚腸道內(nèi)容物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/赤棕魚腸道共生菌;產(chǎn)酶微生物/蛋白酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% Pseudomonas│peli 中文名稱:爛泥假單胞菌種屬:Pseudomonas│peli分離基物:生物樣/軟珊瑚提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的生物活性微生物/軟珊瑚共附生菌,用于篩選活性物質(zhì)產(chǎn)生菌;產(chǎn)酶微生物/脂酶(三丁酸甘油酯).培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Aurantimonas│manganoxydans 中文名稱:橙色單胞菌(加詞待譯)種屬:Aurantimonas│manganoxydans分離基物:生物樣/軟珊瑚提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的生物活性微生物/軟珊瑚共附生菌,用于篩選活性物質(zhì)產(chǎn)生菌;產(chǎn)酶微生物/脂酶(三丁酸甘油酯).培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≤0.5% (water) Pseudoalteromonas│undina 中文名稱:蛹假交替單胞菌種屬:Pseudoalteromonas│undina分離基物:生物樣/軟珊瑚提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的生物活性微生物/軟珊瑚共附生菌,用于篩選活性物質(zhì)產(chǎn)生菌 產(chǎn)酶微生物/脂酶(三丁酸甘油酯)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% |