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 首頁>>產(chǎn)品展示>>定量PCR試劑盒>>熒光定量PCR試劑盒>>毛樣枝孢霉探針法熒光PCR檢測試劑盒

毛樣枝孢霉探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-11-27
點擊次數(shù):
623
產(chǎn)品特點:
毛樣枝孢霉探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次毛樣枝孢霉探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

毛樣枝孢霉探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Cladosporium trichoides

貨號

 YSP96553

熒光染料的優(yōu)點:
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設(shè)計和反應條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
?
熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點:
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點:
成本高;
設(shè)計難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
四甲基硫酸氫銨(離子色譜級,≥99.0%(T))PAK3 Antibody羥基磺酸鈉

三乙(LC-MS淋洗劑,≥99.5%(GC))PAK3 Antibody代叔丁烷

四乙基溴化銨(離子對色譜級)PTMScan® Glutaryl-Lysine [Glut-K] Kit6,6'-二甲基-2,2'-聯(lián)吡啶

四丁基化銨(離子對色譜級)PRAS40 Antibody乙二乙醋酸酯

三辛(離子對試劑)Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) Antibody5-甲基異噁唑-酰氨

甲酸鈉(for HPLC,≥99.0%(NT))PRK2 Antibody4,5-二氨基-6-巰基嘧啶

1-己烷磺酸鈉(離子對色譜級,>98.0%(T))HP1β Antibody2-溴乙酰

高氯酸鈉,無水(for HPLC,99.0%)Pan-Calcineurin A Antibody氟磺酰基二甲酯

四甲基溴化銨(離子對色譜級,≥99.0%(AT))PAK2 (C17A10) Rabbit mAb三氟

三溴(光譜級,>99.0%(GC))PAK2 (C17A10) Rabbit mAb3,二氯

草酸鈉容量分析用溶液標準物質(zhì)(0.05M)HP1α Antibody對甲氧基甲酸乙酯

氫氧化鈉容量分析用標準溶液(0.0997mol/L)eIF4G (C65H5) Rabbit mAb三羥甲基氨烷馬來酸酯

剛果紅(分析標準品,≥97.0%(HPLC))HP1γ Antibody(2S,5S)-2,5-己二

正癸酸(分析標準品,≥99.5%(GC))Jagged1 (28H8) Rabbit mAb并[B]噻吩-乙酸

異丁酸(分析標準品,>99.5%(GC))Jagged1 (28H8) Rabbit mAb2-(1H-吡唑-1-基)乙酸

甲基反亞油酸甲酯(分析標準品)CD161/KLRB1 (HP-3G10) Mouse mAb (PerCP-Cy5.5® Conjuga)N-BOC-L-1,2,3,四氫異喹啉-羧酸

肉豆蔻酸甲酯(分析標準品,≥99.5%(GC))JMJD1B/JHDM2B Antibody2-氨基-5-溴甲酰

三聚(分析標準品,≥99.9%(HPLC))GST Antibody5-溴-2-氟三氟甲
毛樣枝孢霉探針法熒光PCR檢測試劑盒8異(8-iso-PG)ELISA試劑盒NEDD4L/NEDD4-2  泛素連接酶NEDD4-2抗體100 ul

8-異構(gòu)F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒Phospho-NEDD4L (Ser342)  酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體100 ul

8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒NCoR2  核受體輔助抑制因子2抗體100 ul

8-羥基鳥嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)ELISA試劑盒NEP/MME  金屬肽鏈內(nèi)切酶抗體100 ul

6酮F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒NDRG1/Cap43  分化相關(guān)基因NDRG1抗體100 ul

6酮(6-K-PG)ELISA試劑盒Phospho-NDRG1 (Ser330)  酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體100 ul

6-羥多巴(6-OHDA)ELISA試劑盒Phospho-NDRG1 (Thr346)  酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體20 ul

60S核糖體蛋白L36a-樣(RPL36AL)ELISA試劑盒NDRG2  抑癌基因NDRG2抗體100 ul

60S核糖體蛋白L17(RPL17)ELISA試劑盒NDRG3  抑癌基因NDRG3抗體100 ul

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 毛樣枝孢霉 染料法 熒光PCR檢測試劑盒
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