產品名稱:箭毒蛙壺菌PCR檢測試劑盒說明書 英文名稱:Batrachochytrium dendrobatidisPCR 編號:HE30689-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 產品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。 ? 反應五要素: 參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現,DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產品僅用于科研發(fā)現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 28S抗核糖體抗體試劑盒 質量規(guī)格:>99%,BP 包裝;25g 26S蛋白酶體非ATP酶調節(jié)亞基11試劑盒 質量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 25羥基維生素D3試劑盒 質量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g 25羥基維生素D2試劑盒 質量規(guī)格:>50%,BS 包裝;5g 20S蛋白酶體試劑盒 質量規(guī)格:>98%,BR 包裝;100g 2,3-二磷酸甘油酸試劑盒 質量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g 2,3Dinor血栓烷B2試劑盒 質量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 2 型次核苷酸脫氫酶試劑盒 質量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g Ⅰ型前膠原羧基端肽試劑盒 質量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g Ⅰ型前膠原N端前肽試劑盒 質量規(guī)格:BR 包裝;5g Ⅰ型前膠原C末端肽試劑盒 質量規(guī)格:BR 包裝;5g Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽試劑盒 質量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒 質量規(guī)格:BR 包裝;5g Ⅰ型膠原C端肽試劑盒 質量規(guī)格:鉍含量:>56%,BR 包裝;10ml Ⅰ型膠原試劑盒 質量規(guī)格:>99%,BR 包裝;1g 1型1-磷酸鞘氨醇受體試劑盒 質量規(guī)格:>98%,植物激素級 包裝;250mg 17-酮類固醇試劑盒 質量規(guī)格:BR 包裝;25g 箭毒蛙壺菌PCR檢測試劑盒說明書Sporolactobacillus inulinus 中文名稱:菊糖芽孢乳桿菌種屬:Sporolactobacillus inulinus分離基物:雞飼料提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:、D-乳酸培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,硫酸鎂 0.2 g,乙酸鈉 5.0 g,檸檬酸三銨 2.0 g,磷酸氫二鉀 2.0 g,硫酸錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。121℃,15min。生長條件:37℃,厭氧 純度:98% Calibacteriumchanglense=Rhodobacterchanglensis 中文名稱:類紅紅細菌種屬:Calibacteriumchanglense=Rhodobacterchanglensis安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:109生長條件:30℃ 純度:98% Porphyromonas gingivalis 中文名稱:牙齦卟啉單胞菌種屬:Porphyromonas gingivalis分離基物:人類齦溝提供形式:凍干管,斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:,質量控制菌株培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:TSA+5%脫纖維羊血:胰蛋白胨(酪蛋白胰酶消化物) 15.0g,大豆蛋白胨(大豆粉木瓜蛋白酶消化物) 5.0g,氯化鈉 5.0g,瓊脂 15.0g,5%脫纖維羊血,pH7.3±0.2。121℃,15min。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件:37℃,厭氧。存儲條件:2-8℃冷藏 純度:98% pyxidicoccusfallax 中文名稱:匣狀粘球菌種屬:pyxidicoccusfallax安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:169生長條件:30℃ 純度:98% CystobacterSP. 中文名稱:孢囊桿菌種屬:CystobacterSP.安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:169生長條件:30℃ 純度:98% Corallococcusexiguous 中文名稱:弱小珊瑚桿菌種屬:Corallococcusexiguous安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:169生長條件:30℃ 純度:98% Myxococcusxanthus 中文名稱:黃色粘球菌種屬:Myxococcusxanthus安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:169生長條件:30℃ 純度:銥含量:43% Pseudomonasalcaligenes 中文名稱:產堿假單胞菌種屬:Pseudomonasalcaligenes分離基物:游泳池提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002;營養(yǎng)肉汁瓊脂;蛋白胨5.0g,牛肉浸取物3.0g,NaCl5.0g,瓊脂15.0g,蒸餾1.0L,pH7.0。[注]培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mgMnSO4·H2O,則有利于產生芽孢。生長條件:30℃;好氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:銥含量:43% |