產(chǎn)品名稱:幼禽螺桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱:Helicobacter pullorumPCR 編號:HE31067-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 ? 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 N-氨乙基/氨乙基/氨基乙基對二氮己環(huán)/2-(1-基)乙胺/1-2-氨乙基/氮乙基/N-氨基乙基/氨基乙基/AEP 包裝;100g 2-羥乙基/乙醇/1-(β羥乙基)/2-(1-基)乙醇/N-(2-羥乙基)/N-羥乙基/基乙醇/1-Piperazineethanol 包裝;25g 尿酸鈉/尿酸二氫鈉/Uric acid sodium salt 包裝;1g 2,3-二甲基馬來酸/二甲基馬來酸酐/2,3-二甲基馬來酸酐/二甲基順二酸酐/2,3-Dimethylmaleic anhydride 包裝;5g 1,8-環(huán)氧對孟烷/1,3,3-*基-2-氧雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷/歐卡那卜托/桉樹腦/桉葉油醇/1,3,3-*基-2-氧雜二環(huán)[2.2.2]辛烷/1,8-桉樹腦/Cineole 包裝;1g 乙二醇單甲醚/2-甲氧基乙醇/乙二醇甲醚/甲基溶纖劑/甲氧基乙醇/羥乙基甲基醚/乙二醇獨甲醚/2-Methoxyethanol 包裝;25g 2,4-二羥基-6-甲基苯甲酸/2,4-二羥-6-甲基苯甲酸/鄰地衣酸/苔色酸/2,4-Dihydroxy-6-methylbenzoic acid 包裝;5g DL-丙交酯/3,6-二甲基-1,4-二氧雜環(huán)己烷-2,5-二酮/丙交酯/內(nèi)消旋乳酸/DL-Lactide 包裝;25g L-丙交酯/左旋乳酸/L-交酯/(3S,6S)-3,6-二甲基-1,4-二氧雜環(huán)己烷-2,5-二酮/L-Lactide 包裝;5g 嗎啡啉/1,4-氧氮雜環(huán)已烷/四氫-1,4-噁嗪/四氫-1,4-惡嗪/1,4-氧氮六環(huán)/嗎啉/嗎福林/四氫化嗪/對氧氮六環(huán)/對氧氮苯烷/對氧氮己環(huán)/四氫化噁嗪/二亞乙基草酰亞胺/ Morpholine 包裝;1g N,N-二乙基羥胺/二乙基羥胺/N,N-二乙基羥基胺/二乙氫胺/二乙胲/二乙羥胺/DEHA 包裝;25g 萘黃酮/β-萘黃酮/5,6-苯并黃酮/β-萘基黃酮/β-Naphthoflavone 包裝;5g 苯甲?;驶? (N5-2,4-環(huán)戊二烯-1-基)鐵/二羰基環(huán)戊二烯基鐵二聚物/雙(二羰基環(huán)戊二烯鐵)/環(huán)戊二烯基二二聚體/苯甲酰基二羰基(N5-2,4-環(huán)戊二烯-1-基)鐵/Bis(cyclopentadienyl)tetracarbonyl Diiron 包裝;100g 5-氮胞苷/5-氮雜胞嘧啶核苷/5-氮雜胞苷/阿托胞苷/阿扎胞苷/氮胞苷/氮雜胞苷/5-Azacytidine 包裝;25g 鄰甲基對苯二胺硫酸鹽/甲苯二胺硫酸鹽/甲苯-2,5-二胺硫酸鹽/硫酸-2,5-二氨基甲苯/2,5-二氨基甲苯硫酸鹽/2-甲基-1,4-苯二胺硫酸鹽/硫酸對甲苯二胺/硫酸二甲基-1,4-苯二胺/2,5-Diaminotoluene sulfate 包裝;5g 聚氧乙烯雙胺/聚乙烯二胺/聚氧乙烯二胺/聚乙二醇二胺/PEG-diamine 包裝;25g 2-(4-氯苯氧基)-2-甲基丙酸/4-氯苯氧異丁酸/對氯苯氧異丁酸/2-(4-氯苯氧)異丁酸/4-氯苯氧基-α-甲基丙酸/2-甲基-2-(對氯苯氧基)丙酸/2-(4-氯苯氧基)異丁酸/氯貝酸/Clofibric acid 包裝;1g 幼禽螺桿菌PCR檢測試劑盒Nesterenkonia│alba 中文名稱:白色涅斯特連科氏菌種屬:Nesterenkonia│alba分離基物:其他/黑漿處理系統(tǒng)(the black liquor treatment system)提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28-30存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Brachybacterium│squillarum 中文名稱:蝦小短桿菌種屬:Brachybacterium│squillarum分離基物:其他/鹽發(fā)酵的小蝦食品提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28-30存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Brachybacterium│muris 中文名稱:小鼠小短桿菌種屬:Brachybacterium│muris分離基物:生物樣/老鼠的肝臟提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28-30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Corynebacterium│casei 中文名稱:奶酪棒桿菌種屬:Corynebacterium│casei分離基物:沉積物/TVG沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:海洋放線菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃-30&存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Saccharopolyspora│endophytica 中文名稱:植物內(nèi)生糖多孢菌種屬:Saccharopolyspora│endophytica分離基物:沉積物/TVG沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:海洋放線菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃-30&存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% Marinobacter│adhaerens 中文名稱:黏著海桿菌種屬:Marinobacter│adhaerens分離基物:沉積物/TVG沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:海洋細菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% Arthrobacter│subterraneus 中文名稱:地下節(jié)桿菌種屬:Arthrobacter│subterraneus分離基物:沉積物/TVG沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:海洋放線菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% Microcella│sp. 中文名稱:小細胞菌種屬:Microcella│sp.分離基物:沉積物/電視多管采樣提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:海洋放線菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥97% (HPLC) |