產(chǎn)品名稱:紅斑丹毒絲菌PCR檢測試劑盒規(guī)格 英文名稱:Erysipelothrix rhusiopathiaePCR 編號:HE30968-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 ? 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 5-氟乳清酸/5-FOA 質(zhì)量規(guī)格: 包裝;25g 莽草酸/-(-)莽草酸/3,4,5-三羥基-1-環(huán)-1-甲酸/3α,4α,5β-三羥基環(huán)已烯羧酸/蟒草酸/卡瓦根提取物/Shikimic acid 質(zhì)量規(guī)格: 包裝;5g 棕櫚油酸/順式-9-十六(碳)烯酸/9-十六碳烯酸/順-9-十六烯酸/軟脂油酸/順-9-十六碳烯酸/順-9-十六碳烯酸/Palmitoleic acid 質(zhì)量規(guī)格: 包裝;25MG 反式-1,2-環(huán)己二胺四乙酸/反-1,2-環(huán)己二胺-N,N,N',N'-四乙酸/1,2-環(huán)己二胺四乙酸/反式-1,2-二氨基環(huán)己烷-N,N,N′,N′-四乙酸/反-1,2-二氨基環(huán)己基四乙酸單合物/1,2-二氨基環(huán)己四乙酸一化物/(1,2-環(huán)己基二腈)四乙酸鹽單合物/DCTA/CyDTA 質(zhì)量規(guī)格: 包裝;100g 對氨基苯甲酸/4-氨基苯甲酸/對酸/PABA 質(zhì)量規(guī)格:>93.0%(N) 包裝;25g 對氨基苯甲酸鈉/4-氨基苯甲酸鈉/五對氨基苯甲酸鈉/PABA sodium salt 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N) 包裝;5g 對氨基苯磺酸/4-氨基苯磺酸/磺胺酸/-4-磺酸/4-Aminobenzenesulfonic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N) 包裝;1g 順二酸/馬來酸/異二酸/失蘋果酸/(Z)-2-二酸/順?biāo)?Maleic acid 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;250mg 順二酸鈉/馬來酸鈉/(Z)-2-二酸單鈉鹽/失蘋果酸氫鈉/順?biāo)釟溻c/Maleic acid sodium salt 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 包裝;5g 氨基磺酸/氨磺酸/磺酸氨/磺酰胺酸/磺酸胺/胺磺酸/Sulfamic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(N) 包裝;25g 乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸/乙二醇雙(2-氨基)四醋酸/乙二醇二二胺四乙酸/乙二醇雙α-氨基乙基醚四乙酸/乙二醇雙(2-氨基乙基醚)四乙酸/3,6-二氧雜-1,8-辛二胺四乙酸/乙二醇雙(2-氨基乙基醚)四乙酸/依他酸/EGTA 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 包裝;5g 乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸四鈉/乙二醇雙(2-氨基)四醋酸四鈉/乙二醇二二胺四乙酸四鈉/乙二醇雙α-氨基乙基醚四乙酸四鈉/乙二醇雙(2-氨基乙基醚)四乙酸四鈉/3,6-二氧雜-1,8-辛二胺四乙酸四鈉/EGTA tetrasodium 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;1g 乙二胺四乙酸/四乙酸二氨基乙烯/托立龍/四乙酸二氨基乙烯/維爾烯酸/乙底酸/依地酸/EDTA 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;5g 乙二胺四乙酸鐵鈉鹽/EDTA鐵鈉/EDTA一鈉鐵/乙二胺四乙酸一鈉鐵/(OC-6-21)-[[N,N’-1,2-乙二基雙[N-(羧基甲基)氨基乙酸根]](4-)N,N’,O,O’,O,N,O,N’]鐵酸(1-)鈉/鐵依地酸鈉/乙二胺四乙酸鈉鐵(Ⅲ)鹽/EDTA-FeNa 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 包裝;1g 乙二胺四乙酸二鈉鎂鹽四物/EDTA二鈉鎂四物/乙二胺四乙酸鎂二鈉鹽四物/EDTA-MgNa2 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;25g 乙二胺四乙酸二鈉鎂鹽/EDTA二鈉鎂/乙二胺四乙酸鎂二鈉鹽/EDTA-MgNa2 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g N-羥乙基乙二胺-N,N′,N′-三乙酸/氨乙基乙醇胺三乙酸/N-羥乙基乙二胺三乙酸/N-(2-羥乙基)乙二胺三乙酸/N-(2-羥乙基)乙二胺-N,N',N'-三乙酸/羥乙基乙烯二胺三乙酸/N-二-羥乙基-亞乙基二胺三乙酸/HEDTA/HEEDTA 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 包裝;25MG 紅斑丹毒絲菌PCR檢測試劑盒規(guī)格 Anabaena│sp. 中文名稱:魚腥藍(lán)細(xì)菌種屬:Anabaena│sp.提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:異型胞分化調(diào)空研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:48生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:≥98%, FG Acidiphilium│cryptumy1 中文名稱:隱藏嗜酸菌種屬:Acidiphilium│cryptumy1分離基物:生物除臭塔提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:氧化亞鐵硫桿菌伴生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:24生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:≥98%, FG Microsporum│canis 中文名稱:犬小孢子菌種屬:Microsporum│canis分離基物:皮膚組織提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:指示菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:60生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:≥98%, FG Helicobacter│pylori 中文名稱:幽門螺桿菌種屬:Helicobacter│pylori分離基物:胃竇部粘膜組織提供形式:凍結(jié)物安全等級:2模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0021生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:97% Lactobacillus│acidophilus 1 中文名稱:嗜酸乳桿菌1種屬:Lactobacillus│acidophilus 1分離基物:健康孕婦分泌物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0006生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:97% Rhizobium rhizogenes 中文名稱:生根根瘤菌種屬:Rhizobium rhizogenes提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:根瘤菌培養(yǎng)基:酵母提取物 1.0 g,甘露醇 10.0 g,土壤提取液 200 ml,瓊脂 15.0 g,蒸餾 800 ml,pH 7.2,土壤提取液:土壤50克,加200ml 121℃蒸煮1小時(shí),過濾后加補(bǔ)足到200ml。生長條件:28℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% Burkholderia gladioli 中文名稱:唐菖蒲伯克霍爾德氏菌種屬:Burkholderia gladioli提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:30℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% Aeromonas caviae 中文名稱:豚鼠氣單胞菌種屬:Aeromonas caviae分離基物:Epizootic of young guinea pigs提供形式:凍干物,斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:分類研究,模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件:30℃,好氧。生長特性革蘭氏陰性、兼性厭氧、致病菌 純度:98% |