產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:棒桿菌通用PCR檢測試劑盒價格 英文名稱:Corynebacterium spp.PCR 編號:HE30854-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 重組人甲狀旁腺激素1-34/PTH1-34 質(zhì)量規(guī)格:>98%;AR 包裝;50g S-羧甲基-L-半胱氨酸/羧甲司坦/S-羧甲基半胱氨酸/S-Carboxymethyl-L-Cysteine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g N-乙酰-L-谷氨酰胺/茶氨酸/α-乙酰-L-谷氨酰胺/N-乙酰基-L-谷氨酸/乙酰谷氨酰胺/N-α-乙?;?L-谷氨酸鹽/N-α-乙酰-L-谷氨酸/N-Acetyl-L-Glutamine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g L-甘-酪二肽/甘氨酰-L-酪氨酸/Glycyl-L-Tryosine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g 一肌酸/肌酸/N-甲基胍基乙酸/胍基醋酸/肌肉素/肌氨基酸/甲胍基醋酸/Creatine Monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 包裝;5g 肌酐/肌酸酐/肌氨基酐/2-氨基-1-甲基咪唑啉-4-酮/縮肌肉素/2-氨基-1,5-二氫-1-甲基-4H-咪唑啉-4-酮/1-甲基乙內(nèi)酰脲-2-酰亞胺/Creatinine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;1g 3,5-二-L-甲腺氨酸/3,5-二甲腺原氨酸/3,5-二甲腺氨酸/3,5-二無甲狀腺素/O-(4-羥苯基)-3,5-二酪氨酸/3,5-二甲狀腺胺酸/3,5-二-L-甲狀腺原氨酸/O-(對羥基苯基)-3,5-二-L-酪氨酸/3,5-二-L-甲狀腺素/3,5-Diiodo-L-thyronine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g N-(γ-L-谷氨酰)-1-萘胺/N-(γ-L-谷氨酰)-α-萘胺/N-(r-L-Glutamyl)-1-naphthylamide 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 包裝;25g 鹽酸-L-白氨酰-2-萘胺/L-亮氨酰-2-萘胺鹽酸鹽/L-白氨酰-β-萘胺鹽酸鹽/鹽酸-L-亮氨酰-2-萘胺/L(+)-亮氨酰-2-萘基鹽酸氨/L-Leucyl-2-naphthylamide hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 苯甲氧羰酰琥珀酰亞胺/芐基-N-琥珀酰亞胺基碳酸酯/N-(芐氧羰基氧基)琥珀亞胺/N-芐基琥珀酰亞胺碳酸酯/N-芐氧羰氧基丁二酰亞胺/N-(芐羰氧基)丁二酰胺/芐基琥珀酰亞胺基碳酸酯/N-芐氧羰基氧基琥珀酰亞胺/CBZ-OSU/Z-OSU/Z-ONSu 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;50mg 硫酸-5-羥色胺肌酐/5-羥色胺肌酸酐硫酸鹽/5-羥色胺肌氨酸酐硫酸鹽一合物/5-HT 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;100ml 4-氨基馬尿酸鈉/對氨基馬尿酸鈉/4-氨基苯甲酰胺基乙酸鈉/4-氨基苯甲?;拾彼徕c/對氨馬尿酸鈉/Sodium 4-aminohippurate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;500ml 色胺/3-(2-氨乙基)吲哚/β-吲哚基乙胺/2-(3-吲哚基)乙胺/Tryptamine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 酪胺鹽酸/對羥基苯乙胺鹽酸鹽/鹽酸酪胺/Tyramine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;100g 亞氨基二乙酸/亞氨二醋酸/N-(羧甲基)甘氨酸/氨二乙酸/二乙酸亞胺/二羧甲基胺/IDA 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g 甘氨酰-脯氨酰-對硝基對甲苯磺酸鹽/GPDA 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;25g 五肽胃泌素/五肽促胃液素/N-[(1,1-二甲乙氧基)羰基]-β-丙氨酰-L-色氨酰-L-甲硫氨酰-L-門冬氨酰-L-苯丙酰胺/Pentagastrin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 棒桿菌通用PCR檢測試劑盒價格Geobacillus│sp. 中文名稱:土芽孢桿菌種屬:Geobacillus│sp.分離基物:堆肥提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:55℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:≥98% (HPLC) Leucobacter│chromiireducens 中文名稱:還原鉻亮桿菌種屬:Leucobacter│chromiireducens分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在無機(jī)鹽培養(yǎng)基:中以100mg/l的為碳源培養(yǎng),7天內(nèi)三降解率大于60%培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:≥98.0% (HPLC) Pseudomonas│monteilii 中文名稱:蒙氏假單胞菌種屬:Pseudomonas│monteilii分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:可以在含1000mg/l的草甘磷的無機(jī)鹽培養(yǎng)基:中生長培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:≥98.0% (HPLC) Rhodococcus│wratislaviensis 中文名稱:弗氏紅球菌種屬:Rhodococcus│wratislaviensis分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:可以降解對酚,生成紅色中間代謝產(chǎn)物(紅色中間代謝產(chǎn)物不能繼續(xù)被降解),24h內(nèi)對100mg/L的對酚降解率99%培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:≥98% Microbacterium│arabinogalactanolyticum 中文名稱:解阿拉伯半乳聚糖微桿菌種屬:Microbacterium│arabinogalactanolyticum分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:可以以將PLL-1降解對酚所產(chǎn)生的紅色中間代謝產(chǎn)物(可能為4-nitrocatechol)降解掉,24h內(nèi)與PLL-1共同作用可將100mg/L的對硝 基苯酚降解*,降解率95%培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:≥98% Paenibacillus│panacisoli 中文名稱:人參土地類芽孢桿菌種屬:Paenibacillus│panacisoli分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20-30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:≥98% Chitinophaga│ginsengisegetis 中文名稱:人參土噬幾丁質(zhì)菌種屬:Chitinophaga│ginsengisegetis分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類、研究,可以用來生物肥料。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:65生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:99% Paenibacillus│kobensis 中文名稱:神戶類芽孢桿菌種屬:Paenibacillus│kobensis分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:分類、研究,可以用來生物肥料。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:65生長條件:28℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:99% 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |