產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。 產(chǎn)品名稱:土拉熱弗朗西斯菌PCR檢測試劑盒價格 英文名稱:Francisella tularensisPCR 編號:HE31006-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 硫酸鐵銨/硫酸高鐵銨/硫酸鐵(III)銨十二合物/十二合硫酸鐵銨/鐵銨礬/硫酸鐵(Ⅲ)銨/鐵明礬/Ammonium ferric sulfate dodecahydrate 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml in 10%HCl 包裝;25g 硫酸亞鐵銨/硫酸鐵(II)銨六/硫酸低鐵銨/氏鹽/馬爾氏鹽/低鐵礬/亞鐵銨礬/硫酸低鐵銨/硫酸亞鐵銨/硫酸鐵銨/硫酸鐵(Ⅱ)銨/Ferrous ammonium sulfate hexahydrate 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml 包裝;5g 草酸銨/乙二酸銨/乙二酸二銨鹽/一草酸銨/草酸二銨一合物/Ammonium oxalate monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:100µg/mL,基體: 1%HCl 包裝;1g 硫氰酸銨/硫氰化銨/Ammonium thiocyanate 質(zhì)量規(guī)格:濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標準品 包裝;5g 硫酸鋁銨/銨明礬/十二合硫酸鋁銨/鋁銨礬/硫酸銨鋁十二合物/硫酸鋁(III)銨/Aluminum ammonium sulfate 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml 包裝;1g 碳酸氫銨/重碳酸銨/阿莫尼亞粉/酸式碳酸銨/碳銨改性復合粒肥/碳銨/Ammonium bicarbonate 質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL,基體:1%HNO3 包裝;25g 重硫酸銨/硫酸氫銨/酸性硫酸銨/酸式硫酸銨/亞硫酸氫銨/Ammonium bisulfate 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑: 包裝;5g 硼酸銨/硼酸氫銨/偏硼酸銨/四硼酸銨/Ammonium borate 質(zhì)量規(guī)格:1000µg/mL,基體:1%HCl 包裝;1g 溴化銨/溴化铔/溴化氨/Ammonium bromide 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml 包裝;250mg 鉻酸銨/Ammonium chromate 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,介質(zhì):2.0mol/L HCl 包裝;5g 氟鋁酸銨/六氟鋁酸銨/氟化銨鋁/氟化鋁銨/Ammonium fluoaluminate 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:2.0Mol/L HCl 包裝;5MG 氟硼酸銨/四氟合硼酸銨/氟化硼銨/氟硼化銨/硼氟化銨/四氟硼酸銨/Ammonium fluoroborate 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml;溶劑:1.5mol/L硝酸 包裝;10g 氟鈦酸銨/六氟鈦(IV)酸銨/氟化鈦銨/六氟鈦酸銨/Ammonium fluotitanate 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,介質(zhì):0.05mol/L NaOH 包裝;25MG 銨/次亞磷酸銨/卑磷酸銨/Ammonium hypophosphite 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml 包裝;1g 化銨/化铔/Ammonium iodide 質(zhì)量規(guī)格:100µg/mL,基體:1%HNO3 包裝;25g 磷鉬酸銨/二氧磷基鉬酸銨合物/磷鉬酸季銨鹽合物/Ammonium phosphomolybdate hydrate 質(zhì)量規(guī)格:1000µg/mL,基體:10%HCL 包裝;5g 硫酸鎳銨/硫酸亞鎳銨/鎳礬/雙鎳鹽/Ammoninm nickel sulfate hexahydrate 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml 包裝;100ml 土拉熱弗朗西斯菌PCR檢測試劑盒價格Vibrio│adaptatus 中文名稱:適應弧菌種屬:Vibrio│adaptatus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Vibrio│tasmaniensis 中文名稱:塔斯馬尼亞弧菌種屬:Vibrio│tasmaniensis分離基物:海洋沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:近海細菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥97% (HPLC) Agrobacterium│radiobacter 中文名稱:放射形土壤桿菌種屬:Agrobacterium│radiobacter分離基物:樣/下層海提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:生物轉(zhuǎn)化微生物/固氮菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:25-28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% Loktanella│vestfoldensis 中文名稱:福爾山洛克氏菌種屬:Loktanella│vestfoldensis分離基物:生物樣/海藻培養(yǎng)液提供形式:凍干物模式菌株:no應用領(lǐng)域:共生微生物/塔瑪亞歷山大藻藻際細菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:50%乙醇溶液(共聚物Copolymer,7:3) Pseudoruegeria│sp. 中文名稱:假魯杰氏菌種屬:Pseudoruegeria│sp.分離基物:生物樣/海藻培養(yǎng)液提供形式:凍干物模式菌株:no應用領(lǐng)域:共生微生物/塔瑪亞歷山大藻藻際細菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:50%乙醇溶液(共聚物Copolymer,7:3) Rheinheimera│aquimaris 中文名稱:萊茵海默氏菌種屬:Rheinheimera│aquimaris分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:有機污染物降解菌/多環(huán)芳烴(PAHs)降解菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Nonlabens│tegetincola 中文名稱:居墊不滑動菌種屬:Nonlabens│tegetincola分離基物:樣/上層海提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領(lǐng)域:海洋可培養(yǎng)細菌多樣性研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:511生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Agrobacterium│gelatinovorum 中文名稱:食明膠土壤桿菌種屬:Agrobacterium│gelatinovorum分離基物:海底表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應用領(lǐng)域:potential antifouling 潛在的抗污損活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:467生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% 反應五要素: 參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應用,并逐步應用于臨床。 |