服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 產(chǎn)品名稱 | 牛腎盂腎炎棒桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書 | 英文名稱 | Corynebacterium renalePCR | 貨號(hào) | HE30853-R |
實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建 ? 特點(diǎn)優(yōu)勢(shì): 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。 5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。 5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。 6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。 8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 γ-氨基丁酸/4-氨基丁酸/氨酪酸/氨酷酸/丁氨酸/GABA 質(zhì)量規(guī)格:>95%,一合物 包裝;25g γ-L-谷氨酰-α-萘酰胺/γ-L-谷氨酰-1-萘酰胺/N-(γ-L-谷氨酰)-1-萘胺/L-谷氨酰-1-萘胺/γ-L-谷氨酰-α-萘胺/γ-L-Glutamyl-α-naphthylamide 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 包裝;5g γ-L-谷氨酰-β-萘酰胺/γ-L-谷氨酰-2-萘酰胺/N-(L-谷氨酰基)-β-萘胺/L-谷氨酰-2-萘胺/N-(L-谷氨?;?-β-萘胺/γ-L-谷氨酰-β-萘酰胺/γ-L-Glutamyl-β-naphthylamide 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 包裝;1g γ-L-谷氨酰對(duì)硝基一合物/L-谷氨?;?4-硝基/L-γ-谷氨酰-對(duì)硝基/γ-L-谷氨?;?4-硝基/GPNA/H-Glu-PNA 質(zhì)量規(guī)格:>99% 包裝;5g γ-谷氨酰-3-羥基-4-硝基單胺鹽/γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基單鹽/L-Glutamic acid γ-(3-carboxy-4-nitroanilide) ammonium salt 質(zhì)量規(guī)格:>99% 包裝;500mg 氧化型谷胱甘肽/N-(N-L-γ-谷胺?;?L-半胱胺酰基)甘氨酸-2,2-二硫化物/L-谷胱甘肽(氧化型)/氧化谷胱甘肽/GSSG 質(zhì)量規(guī)格:>99% 包裝;25g 還原型谷胱甘肽/L-還原型谷胱甘肽/5-L-谷氨酰-L-半胱氨酰甘氨酸/GSH 質(zhì)量規(guī)格:>68% 包裝;5g 磷酸組胺/組胺磷酸鹽/二磷酸組織胺/二磷酸組胺/磷酸組織胺/組織胺二磷酸鹽/Histamine diphospate 質(zhì)量規(guī)格:>50% 包裝;25g 組胺/2-咪唑基乙胺/組織胺/β-氨乙基咪唑/β-氨乙基甘噁啉/1H-咪唑-4-乙胺/Histamine 質(zhì)量規(guī)格:>30% 包裝;5g 組胺/組胺雙鹽酸鹽/二鹽酸組胺/二鹽酸-1H-咪唑-4-乙胺/2-(4-咪唑基)乙胺/二鹽酸-β-氨乙基甘惡啉/二鹽酸組織胺/Histamine dihydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;1g L-肌肽/N-β-丙氨酰-L-組氨酸/β-氨基-L-丙酰組氨酸/L-肉縮氨基酸/L-肉縮酸/β-丙氨酰-L-組氨酸/L-Carnosine 質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR 包裝;250mg L-多巴/3-羥基-L-酪氨酸/左旋多巴/L-β-(3,4-二羥基苯)丙氨酸/L-3-(3,4-二羥基苯)丙氨酸/左多巴/3-(3,4-二羥基苯)-L-丙氨酸/β-[3,4-二羥苯基]L-初油氨基酸/L-Dopa 質(zhì)量規(guī)格:>99% 包裝;100g L-甲狀腺素/O-(4-羥基-3,5-二苯基)-3,5-二-L-酪氨酸/3,5,3′,5′-四-L-甲狀腺原氨酸/3-[4-(4-羥基-3,5-二苯氧基)-3,5-二苯基]-L-丙氨酸/2-甲狀腺素/L-β-(3,5-二磺-4-羥基苯氧基)-3,5-二磺苯丙氨酸/左甲狀腺素/T4 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;25g L-甲狀腺素鈉/(2S)-2-氨基-3-[4-(4-羥基-3,5-二-苯氧基)-3,5-二苯基]丙酸鈉/L-甲狀腺胺鈉/3,5,3′,5′-四甲狀腺-L-原氨酸鈉/左旋甲狀腺素鈉/L-膩,3',5'-四甲狀腺氨酸鈉/3',3,5',5-四甲腺原氨酸鈉鹽五合物/O-(4-羥基-3,5-二苯基)-3,5-二-L-酪氨酸單鈉鹽五合物/L-thyroxine sodium 質(zhì)量規(guī)格:>99% 包裝;5g L-腎上腺素/副腎素/(R)-腎上腺素/副腎堿/1-(3,4-二羥基苯基)-2-甲氨基乙醇/3,4-二羥基-α-(甲氨基甲基)芐醇/腎上腺素/L(-)-Epinephrine 質(zhì)量規(guī)格:>97% 包裝;25g L-去甲腎上腺素/去甲腎上腺素/(R)-4-(2-氨基-1-羥基乙基)-1,2-苯二酚/L-Noradrenaline 質(zhì)量規(guī)格:>97%,USP 包裝;5g 重組人甲狀旁腺激素1-84/PTH1-84 質(zhì)量規(guī)格:>97% 包裝;10g 牛腎盂腎炎棒桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說明書Bacillus│simplex 中文名稱:簡(jiǎn)單芽胞桿菌種屬:Bacillus│simplex分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:20℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:97%,含0.1% hydroquinone穩(wěn)定劑 Comamonas│sp. 中文名稱:叢毛單胞菌種屬:Comamonas│sp.分離基物:堆肥提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在無機(jī)鹽培養(yǎng)基:中添加100ppm的DEHP,經(jīng)過紫外掃描能降解形成代謝中間產(chǎn)物但不能開環(huán)。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:97%,含0.1% hydroquinone穩(wěn)定劑 Microbacterium│lacticum 中文名稱:乳微桿菌種屬:Microbacterium│lacticum分離基物:提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在無機(jī)鹽培養(yǎng)基:中降解100ppm對(duì)鄰苯二酚,降解率為80~90%培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:97%,含0.1% hydroquinone穩(wěn)定劑 Achromobacter│insolitus 中文名稱:罕見無色小桿菌種屬:Achromobacter│insolitus分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在無機(jī)鹽培養(yǎng)基:中以10mg/L的聯(lián)苯為碳源培養(yǎng),24h內(nèi)對(duì)10mg/L的聯(lián)苯降解率99.5%;24h內(nèi)對(duì)5ppm萘和菲降解率大于95%培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:97%,含0.1%對(duì)叔丁基鄰苯二酚(TBC)穩(wěn)定劑 Virgibacillus│marismortui 中文名稱:死海枝芽孢桿菌種屬:Virgibacillus│marismortui分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:耐受10%的NaCl培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:97%,含0.1%對(duì)叔丁基鄰苯二酚(TBC)穩(wěn)定劑 Staphylococcus│sciuri 中文名稱:松鼠葡萄球菌種屬:Staphylococcus│sciuri分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:耐受10%的NaCl培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:97% Halobacillus│trueperi 中文名稱:特氏鹽芽孢桿菌種屬:Halobacillus│trueperi分離基物:酸菜鹵汁提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在10%NaCl培養(yǎng)基:上能夠生長(zhǎng)。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:>98.0%(GC) Sphingomonas│xenophaga 中文名稱:食異源物鞘氨醇菌種屬:Sphingomonas│xenophaga分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:能于30℃、48小時(shí)內(nèi)降解濃度為100ppm的菲,降解率為90%,菲為碳源(無機(jī)鹽培養(yǎng)基:)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:>98.0%(GC) |