保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 產(chǎn)品名稱:哈特帕克病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱:Hart Park VirusRTPCR 編號:HE31063-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。 氰酸鉀/Potassium cyanate 包裝;5g 氰酸鈉/異氰酸鈉/Sodium cyanate 包裝;25g 二氨荃庚二酸/2,6-二氨基庚二酸/2,6-Diaminopimelic acid 包裝;5g 朱砂蓮甲素/大黃素/1,3,8-三羥基-6-甲基蒽醌/瀉素/2-甲基-4,5,7-三羥基蒽醌/6-甲基-1,3,8-三羥基蒽醌/瀉鼠李樹皮/Emodin 包裝;1g 氧化槐果堿/Oxysophocarpine 包裝;5g 氧化槐定堿/Oxysophoridine 包裝;1g 苦豆堿/Aloperine 包裝;25g 野定堿/野靛堿/野啶堿/金鏈花堿/金雀花酮堿/(-)-金雀花堿/金蓮花素/烏樂堿/野靛毒/金蓮花堿/Cytisine 包裝;5g 異戊烯基溴/4-溴-2-甲烷-2-丁烷/1-溴-3-甲基-2-/4-溴-2-甲烷-2-/3,3-二甲基烯丙基溴/4-溴-2-甲基-2-/1-溴-3-甲基/1-溴-3-甲烷-2-/溴代異戊烯/3,3-Dimethylallyl bromide 包裝;1g 二基丙基酰胺/二甲氨基丙基酰胺/N-(3-二甲氨基丙基)酰胺/N,N-二甲氨基丙基酰胺/N,N-二丙基酰胺/DMAPAA 包裝;5g 聚四氟乙烯樹脂/聚四氟乙烯/四氟乙烯的均聚物/特氟隆/鉻姆沙伯T/PTFE 包裝;1g 仿/海仿/黃/*烷/IPG干膠條/Iodoform 包裝;5g 2-氰基苯甲酸/鄰氰基苯甲酸/2-Cyanobenzoic acid 包裝;250mg 野百合堿/單響尾蛇毒蛋白/大葉豬尿青堿/農(nóng)吉利甲素/農(nóng)吉利堿/豬屎豆堿/大葉豬屎青堿/Crotaline 包裝;1g 3-吡啶磺酸/吡啶-3-磺酸/3-Pyridinesulfonic acid 包裝;25g 三乙氧基甲基硅烷/甲基三乙氧基硅烷/甲基三氧乙基硅烷/甲基三乙氧基矽烷/MTES 包裝;5g 鄰苯二甲酸二異壬基酯/鄰苯二羧酸-二-C8-10支鏈烷基酯/鄰苯二甲酸二壬烷/鄰苯二甲酸二異壬酯/增塑劑DINP/鄰酞酸二異壬酯/1,2-苯二甲酸二異壬酯/DINP 包裝;10MG 哈特帕克病毒PCR檢測試劑盒Burkholderia│glathei 中文名稱:伯克霍爾德氏菌(加詞待譯)種屬:Burkholderia│glathei分離基物:土壤/紅土lateritic soil提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:266生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:96% Microbacterium│gubbeenense 中文名稱:微桿菌(加詞待譯)種屬:Microbacterium│gubbeenense分離基物:生物樣/健康鮑魚腸道提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/鮑魚腸道共生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:96% Yangia│pacifica 中文名稱:太平洋楊氏菌種屬:Yangia│pacifica分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機污染物降解菌/分離自十溴聯(lián)苯醚富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:96% Oceanisphaera│sediminis 中文名稱:沉積物大洋球形菌種屬:Oceanisphaera│sediminis分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機污染物降解菌/分離自十溴聯(lián)苯醚富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Microbacterium│dextranolyticum 中文名稱:解葡聚糖微桿菌種屬:Microbacterium│dextranolyticum分離基物:沉積物/TVG表層沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機污染物降解菌/分離自草甘膦富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Algoriphagus│sp. 中文名稱:噬冷菌種屬:Algoriphagus│sp.分離基物:沉積物/TVG表層沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機污染物降解菌/分離自草甘膦富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Tsukamurella│pulmonis 中文名稱:肺冢村氏菌種屬:Tsukamurella│pulmonis分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機污染物降解菌/分離自草甘膦富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% Hyphomonas│johnsonii 中文名稱:約氏生絲單胞菌種屬:Hyphomonas│johnsonii分離基物:生物樣/柳珊瑚提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:南大西洋細菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% |