產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:多里病毒PCR檢測試劑盒說明書 英文名稱:Dhori VirusRTPCR 編號:HE30889-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 硫酸阿米卡星/硫酸丁胺卡那霉素/阿米卡霉素/O-3-氨基-3-脫氧-alpha-D-葡吡喃糖基-(1→6)-O-[(6-氨基-6-脫氧-alpha-D-葡吡喃糖基-(1→4)]-N-(4-氨基-2-羥基-1-氧丁基)-2-脫氧-D-鏈霉胺硫酸鹽/Amikacin sulfate salt 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 阿米卡星/丁胺卡那霉素/氨基羥丁基卡那霉素A/抗菌素BBK8/Amikacin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;100g 卡莫司汀/卡氮芥/雙氯乙亞硝脲/氯乙亞硝脲/氯化亞硝脲/亞脲氮芥/1,3-雙(2-氯乙基)-1-亞Carmustine/BCNU 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 莫能菌酸鈉/莫能星鈉/摩能霉素鈉/莫能霉素鈉/莫能菌素鈉/Monensin sodium 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 替卡西林鈉/羧噻吩青霉素鈉/替卡西林二鈉/(2S,5R,6R)-3,3-二甲基-6-[2-羧基-2-(2-噻吩基)乙酰氨基]-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚烷-2-羧酸二鈉鹽/Ticarcillin disodium salt 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 鏈脲佐菌素/鏈脲霉素/鏈氮霉素/鏈脲菌素/鏈佐星/鏈唑霉素/2-脫氧-2-[[ (甲基亞硝基氨基)羰基]-氨基]-D-吡喃葡萄糖/STZ/Streptozotocin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 鹽酸四環(huán)素/四環(huán)素鹽酸鹽/Tetracycline HC1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g 四環(huán)素/四環(huán)素堿/4-(二甲基氨基)-1,4,4A,5,5A,6,11,12A-八氫-3,6,10,12,12A-五羥基-6-甲基-1,11-二羰基-2-萘甲酰胺/Tetracycline 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 頭孢曲松鈉/頭孢三嗪噻肟/(6R,7R)-7-[[(2E)-2-(2-氨基-1,3-噻唑-4-基)-2-甲氧基亞氨乙酰]氨基]-3-[(2-甲基-5,6-二氧代-1H-1,2,4-三嗪-3-基)硫甲基]-8-氧代-5-硫-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸/Ceftriaxone sodium 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 頭孢曲松/頭孢三嗪噻肟/(6R,7R)-7-[[(2E)-2-(2-氨基-1,3-噻唑-4-基)-2-甲氧基亞氨乙酰]氨基]-3-[(2-甲基-5,6-二氧代-1H-1,2,4-三嗪-3-基)硫甲基]-8-氧代-5-硫-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸/三嗪噻肟頭孢菌素/氨噻三嗪頭孢菌素/頭孢氨噻三嗪/Ceftriaxone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5MG 頭孢唑啉鈉/頭孢拉定V/先鋒霉素V/唑啉頭孢菌素鈉/(6R,7R)-3-[[(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)硫]甲基]-7-[(1H-四唑-1-基)乙酰氨基]-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸鈉鹽/Cefazolin sodium salt 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;10MG 嘌呤霉素鹽酸鹽/二氫氯化嘌呤毒素/Puromycin dihydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 多粘菌素B硫酸鹽/硫酸多粘菌素B/多勝菌素乙/多粘菌素B硫酸酯/硫酸阿羅多粘/Polymyxin B sulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;250mg 多粘菌素E硫酸鹽/硫酸粘桿菌素/多粘菌素E/硫酸粘菌素/粘桿菌素B/黏菌素硫酸鹽/Colistin sulfate salt 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g 鏈霉素硫酸鹽/硫酸鏈霉素/O-2-脫氧-2-甲氨基-alpha-L-葡吡喃糖基-(1→2)-O-5-脫氧-3-C-甲?;?alpha-L-來蘇呋喃糖基-(1→4)-N1,N3-二脒基-D-鏈霉胺硫酸鹽/2,4-二胍基-3,5,6-三羥基環(huán)己基-5-脫氧-2-O-(2-脫氧-2-基-Α-L-吡喃葡萄糖基)-3-C-甲酰-Β-L-來蘇戊呋喃糖甙/Strepomycin sulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 鹽酸萬古霉素/萬古霉素鹽酸鹽/Vancomycin HC1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 去甲基鹽酸萬古霉素/鹽酸去甲萬古霉素/Norvoncomycin hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g 多里病毒PCR檢測試劑盒說明書Actinomadura│longispora 中文名稱:長孢馬杜拉放線菌種屬:Actinomadura│longispora分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:32℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:高純級 Nonomuraea│sp. 中文名稱:野野村氏菌種屬:Nonomuraea│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:69℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法 純度:高純級 Streptomyces│olivaceoviridis 中文名稱:橄欖綠鏈霉菌種屬:Streptomyces│olivaceoviridis分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法 純度:90% Streptomyces│tauricus 中文名稱:公牛鏈霉菌種屬:Streptomyces│tauricus分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法 純度:90% Streptomyces│candidus 中文名稱:純白鏈霉菌種屬:Streptomyces│candidus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:27生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法 純度:98% Streptomyces│violens 中文名稱:呈紫色鏈霉菌種屬:Streptomyces│violens提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:Degrades 4-hydroxybenzoate培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:455生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法 純度:98% Rhodococcus│erythropolis 中文名稱:紅城紅球菌(紅串紅球菌)種屬:Rhodococcus│erythropolis提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:Taxonomy/description (1300, 2019, 2184). Produces cholesterol oxidase (U.S. Pat. 3,925,164), 3-keto Δ1,4 steroids (U.S. Pat. 3,010,876). Conversion of phenol and naphthalene.培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:445生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法 純度:97% Micromonospora│aurantiaca 中文名稱:桔橙小單孢菌種屬:Micromonospora│aurantiaca提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:代謝產(chǎn)物具有抗細(xì)菌活性。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:27生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法 純度:97% 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |