產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。 產(chǎn)品名稱:人皰疹病毒(HHV)核酸試劑盒 規(guī)格:48T/盒 編號:HE32355-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 3-喹啉酸頻哪酯 171364-85-5三七總皂苷骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)95% 2-溴-9,9'-螺二[9H-芴] 171408-76-7三七莖葉皂苷骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98% 2-溴-9,9'-螺二[9H-芴] 171408-76-7精氨酸骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPRⅡ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98% 2,7-二溴-9,9-螺二芴 171408-84-7氨酸骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPRⅡ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98% 2,7-二溴-9,9-螺二芴 171408-84-7纈氨酸骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPRⅡ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98% 1-溴芘 1714-29-0瓜氨酸上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)96% 1-溴芘 1714-29-0亮氨酸上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)96% 1-溴芘 1714-29-0兒茶素二級淋巴組織趨化因子(SLC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)96% Tadalafil 171596-29-5表兒茶素趨化因子C-基元受體1(XCR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)≥99% 4-羥基環(huán)己烷甲酸乙酯 17159-80-7腺苷白介素8受體α(IL8Rα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%,順式和反式混合物 4-羥基環(huán)己烷甲酸乙酯 17159-80-7土荊皮乙酸唾液酸結(jié)合Ig樣凝集素3(SIGLEC3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%,順式和反式混合物 Sildenafil Citrate 171599-83-0龍腦唾液酸結(jié)合Ig樣凝集素3(SIGLEC3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)≥98% (HPLC) 1-(3-氯氧基)-4-氟苯 1716-42-3木蘭脂素睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)≥97% 1-(3-氯氧基)-4-氟苯 1716-42-3葫蘆巴堿睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)≥97% 2,2-二氟-2-(氟磺酰)醋酸鹽 1717-59-5大葉茜草素血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(PROCR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97% 人皰疹病毒(HHV)核酸試劑盒人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Aspergillus flavipes 小鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用 大鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用 人血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae 小鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Helicostylum piriforme 大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用 人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Pontibacter sp. 小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Pseudomonas alcaliphila 反應五要素: 參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應用,并逐步應用于臨床。 |