產(chǎn)品名稱:甜菜堿(Betaine)試劑盒品牌 規(guī)格:48樣、96樣、 貨號:GOY-016344 檢測方法:可見分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類:氧化應(yīng)激系列 公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個月 【實驗前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮氣吹干裝 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
測定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點: ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。 膠柱頭孢霉屬APC(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人多聚血清(PHSA)試劑盒 Paenibacillus taichungensisCDK2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人非元性烯化(NNE)試劑盒 植物乳桿菌CDK3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人3特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)試劑盒 大腸埃希氏菌CDK4(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人黑色激(MSH)試劑盒 深藍(lán)紫色桿菌CDK6(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人巨噬趨化因子(MCF)試劑盒 大腸埃希菌P16(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人葡萄球菌A(SPA)試劑盒 玉米黑粉菌P21(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人酪氨羥化(TH)試劑盒 香菇Cr04P27(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人葡萄糖氧化(GOD)試劑盒 大腸埃希氏桿菌P35(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人普通急性淋巴白血病抗原(CALLA)試劑盒 尖孢鐮孢P35/P25(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人膜攻擊復(fù)合物(MAC)試劑盒 彩色豆馬勃Annexin V(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人胎盤催乳(HPL)試劑盒 熒光假單胞菌PAR-1(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人胎盤(PP)試劑盒 尖孢鐮刀菌PAR-2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人胎盤核糖核抑止劑(HPRI)試劑盒 扁柄側(cè)耳PAR-3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人胃泌抗體(GCA)試劑盒 紅曲紅曲PARP(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人纖維連接相關(guān)抗原(FRA)試劑盒 褐囊蜜環(huán)菌AKT(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人乙酯(ChE)試劑盒 釀酒酵母P38(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人鞭毛(flagellin)試劑盒 枯草芽孢桿菌PDGF-A(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人α烯化(α-enolase)試劑盒 黑曲霉PDGF-B(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人不透光相關(guān)(OPAs)試劑盒 釀酒酵母VEGF(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)人重去甲腎上腺(NE-B)試劑盒 甜菜堿(Betaine)試劑盒品牌幾丁質(zhì)檢測試劑盒A型病H9N1血凝型抗體 己糖激檢測試劑盒人類狀瘤病33抗體 交替氧化檢測試劑盒A型病H1N1抗體 精氨檢測試劑盒甲型肝炎病聚VP1抗體 抗壞血過氧化物檢測試劑盒造血干特異性抗體 可溶性質(zhì)檢測試劑盒轉(zhuǎn)化生長因子β1誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子1抗體 可溶性淀粉檢測試劑盒同源盒C6抗體 可溶性糖檢測試劑盒同源盒C4抗體 操作步驟: 實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。
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