特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結合到模板上，探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題，反應結束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
水楊酸-辛基酯(>95.0%(GC))2-氟-6-酚

水楊酸對甲酯(>95.0%(GC))3,二氟甲酸

水楊酸酯(>98.0%(T))酸二芐酯

水楊酸-叔丁基酯(>98.0%(GC))芐基溴

對二甲酸雙[(甲氧羰基)基]酯(>97.0%(HPLC))2-氨基-5-溴-噻唑鹽

N-(甲氧基-2-羥基亞甲基)-丁基(>98.0%(HPLC)(T))2,5-二溴對二甲酸

4'-丁氧基亞甲基-基(>98.0%(T))2-氨基-4,5-二氟甲酸

4'-(戊氧基)亞甲基-基(>96.0%(HPLC)(T))2-丁基-(羥基甲?；?-5-并呋喃

[(甲氧基亞甲基)氨基]肉桂酸丁酯(>98.0%(T))2-丁基-(甲氧基甲?；?-5-并呋喃

亞甲基-2-萘(>98.0%(N))2-丁基-5-并呋喃

對二甲酸雙(對氨基)(>98.0%(GC)(N))維拉唑酮中間體(代丁基)-5-基吲哚

對二甲酸雙(氟代)(>98.0%(N))N-Boc-順式-羥基-L-脯氨酸

丁氧基亞甲基-4'-戊基(>98.0%(T))2-叔丁氧基羰氨甲酸

4'-亞甲基-丁氧R-1-1H-芐氧基吡咯烷鹽酸鹽

4'-亞甲基-氧(>98.0%(T))(S)-5-溴甲基-2-吡咯烷酮

4'-氧基亞甲基-氨基甲(>98.0%(GC)(N))(1S,2S)-(+)-N,N'-二甲基-1,2-環(huán)己二

4'-氧基亞甲基-丁基(>99.0%(T))福多斯坦

4'-己氧基亞甲基-基(>98.0%(T))1-金剛烷基二酸
錦鯉皰疹病毒基因探針法熒光PCR檢測試劑盒1號染色體開放閱讀框125抗體L-enk/FITC  熒光素標記抗亮氨酸腦啡肽抗體IgG100 ul

1號染色體開放閱讀框129抗體 Beta-lactoglobulin/FITC  熒光素標記牛β-球蛋白抗體IgG20 ul

1號染色體開放閱讀框159抗體 Beta-lactoglobulin/FITC  熒光素標記牛β-球蛋白抗體IgG100 ul

1號染色體開放閱讀框163抗體 Beta-lactoglobulin/FITC  熒光素標記牛β-球蛋白抗體IgG100 ul

1號染色體開放閱讀框172抗體Laminin alpha5/FITC  熒光素標記層粘蛋白α5抗體IgG100 ul

1號染色體開放閱讀框2抗體LAG-3/CD223/FITC  熒光素標記淋巴細胞活化基因-3抗體IgG100µl

1號染色體開放閱讀框19抗體lamin A/FITC  熒光素標記核纖層蛋白A抗體IgG500 ul

1號染色體開放閱讀框25抗體Laminin Beta1/FITC  熒光素標記層粘連蛋白β1抗體IgG100 ul

1號染色體開放閱讀框31抗體lamin B/FITC  熒光素標記核纖層蛋白B抗體IgG100 ul