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馬流感病毒亞型PCR檢測試劑盒說明書

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更新日期:
2020-11-05
點擊次數(shù):
468
產(chǎn)品特點:
馬流感病毒亞型PCR檢測試劑盒說明書實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
  50T馬流感病毒亞型PCR檢測試劑盒說明書的詳細(xì)資料:

服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

馬流感病毒亞型PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 Equine Influenza Virus(EIV)H3N8RTPCR

 貨號

 HE30961-R

實驗外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建

?
特點優(yōu)勢:
    1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
硅烷偶聯(lián)劑KH570/3-(異酰氧)丙基*氧基硅烷/3-(甲基酰氧)丙基*氧基硅烷/*基硅烷丙基酸脂/3-(*氧基甲硅烷基)丙基-2-甲基-2-酸酯/γ-(2,3-環(huán)氧丙氧)丙基*氧基硅烷/γ-甲基酰氧基丙基*氧基硅烷/3-(*氧基硅烷)丙基酸脂/MEMO 質(zhì)量規(guī)格: 包裝;10MG

有機硅消泡劑/Silicone defoamer 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 包裝;25g

離子交換劑Ⅰ/CG-50離子交換樹脂/離子交換劑CG-50/陽離子交換樹脂CG-50/CG-50弱酸型陽離子交換樹脂/Amberlite CG-50 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;25g

離子交換劑Ⅲ 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g

離子交換劑Ⅴ 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;1g

十烷基*基溴化銨/(1-癸基)*基溴化銨/癸基*基溴化銨/正溴化癸*基銨/Decyltrimethylammonium bromide 質(zhì)量規(guī)格: 包裝;100g

液體生物防腐劑/Proclin 300 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T) 包裝;25g

布魯諾廣譜高效殺菌劑/溴硝醇/2-溴-2-硝基-1,3-/拌棉醇/溴硝/抑菌醇/皮樂寶/布羅波爾/布洛波爾/2-溴-2-硝基-1,3-/溴丙醇/溴硝丙醇/2-硝基-2-1,3-/Bronorol 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g

1,3-二甲基脲/二甲基脲/N,N-二甲基脲/1,3-二甲脲/1,3-二甲基尿素/對稱二甲基脲/均二甲脲/1,3-Dimethylurea 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 包裝;25g

鈀碳加氫催化劑/鈀碳酸鈣/林德拉催化劑/Palladium on carbon hydrogenation 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5g

鉻霧抑制劑/Chromic acid fog inhibitor 質(zhì)量規(guī)格: 包裝;100mg

偶氮脒類引發(fā)劑V30/偶氮異丁氰基甲酰胺/1-((氰基-1-甲基乙基)偶氮)甲酰胺/CABN 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;500mg

偶氮脒類引發(fā)劑V40/偶氮二環(huán)己基甲腈/1,1'-偶氮雙(環(huán)己烷甲腈)/1,1'-偶氮(氰基環(huán)己烷)/1,1'-偶氮二環(huán)己腈/偶氮二環(huán)己腈/1,1’-偶氮二環(huán)己腈/1,1′-偶氮-二-(六氫芐腈)/1,1'-氮雜雙(環(huán)己烷-1-腈)/1,1'-偶氮(環(huán)己基-1-氰基)/偶氮二(環(huán)己烷-1-腈)/ACCN/VAZO88 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 包裝;1g

偶氮脒類引發(fā)劑V50/2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)/2,2'-偶氮二異丁基脒/偶氮二(2氨基丙脒)鹽酸鹽/偶氮二異丁脒鹽酸鹽/偶氮脒類引發(fā)劑VAZO56/2,2’-偶氮二(2-甲基丙脒)/2,2’-偶氮二(2-脒基丙烷)/2,2’-偶氮二異丁脒氫氯化物/2,2'-氮雜雙(2-咪唑丙烷)/AAPH/AIBA 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 包裝;5g

偶氮脒類引發(fā)劑V59/偶氮二異戊腈/2,2'-偶氮(2'-甲基)/2,2'-偶氮-二-(2'-甲基)/2,2'-偶氮雙二異戊腈/2,2'-氮雜雙(2-甲)/偶氮二甲基/AMBN/VAZO67 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(T) 包裝;25g

偶氮脒類引發(fā)劑V60/偶氮二異/2,2-偶氮二異/2,2′偶氮二(2-甲基)/發(fā)孔劑N/發(fā)乳劑N /AIBN/VAZO64 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 包裝;5g

偶氮脒類引發(fā)劑V65/偶氮二異庚腈/2,2'-偶氮二異庚腈/2,2'-偶氮雙(2,4-二甲基戊腈)/ 2,2’-偶氮-二-(2,4-二甲基戊腈)/偶氮二甲基戊腈/2,2'-氮雜雙異庚腈/ABVN/VAZO52 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 包裝;25g
馬流感病毒亞型PCR檢測試劑盒說明書Pichia burtonii 中文名稱:伯頓畢赤酵母(斜面)種屬:Pichia burtonii提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:越南飼料酵母(可利用淀粉, 生米糠);雞糞除臭培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:YM 培養(yǎng)基:酵母提取物,3.0 g 麥芽提取物,3.0 g 葡萄糖,10.0 g 蛋白棟,5.0 g 瓊脂,20.0 g 蒸餾1000 ml ,pH 6.2 +/- 0.2生長條件:25-28℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:96%

Thiobacillus│intermedius 中文名稱:中間硫桿菌種屬:Thiobacillus│intermedius分離基物:生物除臭塔提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:降解二氧化硫培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:412生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:96%

Mycobacterium│phlei 中文名稱:草分枝桿菌種屬:Mycobacterium│phlei提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:38生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:96%

Ralstonia│solanacearum 中文名稱:茄科羅爾斯通氏菌種屬:Ralstonia│solanacearum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:96%

Lactobacillus gasseri 中文名稱:加氏乳桿菌種屬:Lactobacillus gasseri提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,硫酸鎂 0.2 g,乙酸鈉 5.0 g,檸檬酸三銨 2.0 g,磷酸氫二鉀 2.0 g,硫酸錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。121℃,15min。生長條件:37℃,微好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%

Lactobacillus salivarius 中文名稱:唾液乳桿菌種屬:Lactobacillus salivarius提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,硫酸鎂 0.2 g,乙酸鈉 5.0 g,檸檬酸三銨 2.0 g,磷酸氫二鉀 2.0 g,硫酸錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。121℃,15min。生長條件:37℃,厭氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%

Bacteroides thetaiotaomicron 中文名稱:多形擬桿菌種屬:Bacteroides thetaiotaomicron分離基物:人臉提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:;與柳杉花粉熱有關(guān)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:PYG培養(yǎng)基:多胨 5.0 g,胰胨 5.0 g,酵母提取物 10.0 g,葡萄糖 10.0 g,鹽溶液 40.0 ml,蒸餾 960 ml,瓊脂 10.0 g,pH 7.2 ,鹽溶液: ,CaCl 0.2 g,MgSO4·7H2O 0.4 g,K2HPO4 1.0 g,KH2PO4 1.0 g,NaHCO3 10.0 g,NaCl 12.0 g,蒸餾 1.0 L 哥倫比亞血平板生長條件:37℃,厭氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%

Magnetospirillum│gryphiswaldense 中文名稱:格利菲斯瓦爾德鎮(zhèn)磁螺菌種屬:Magnetospirillum│gryphiswaldense分離基物:river sediment提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:932生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 馬流感病毒亞型 PCR檢測試劑盒 50T
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