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Western轉(zhuǎn)移緩沖液(5×),PVDF

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更新日期:
2024-08-15
點(diǎn)擊次數(shù):
843
產(chǎn)品特點(diǎn):
Western轉(zhuǎn)移緩沖液(5×),PVDF儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸,4℃保存,5×SDS-PAGE上樣液短期4℃保存,長(zhǎng)期可放-20℃保存,有效期一年。
  500mlWestern轉(zhuǎn)移緩沖液(5×),PVDF的詳細(xì)資料:

產(chǎn)品特點(diǎn):

1. 提取過(guò)程十分簡(jiǎn)便,勻漿離心即可,整個(gè)過(guò)程只需要十幾分鐘。

2. 采用*的溫和裂解成分,蛋白保持天然活性。

3.適用于各種動(dòng)植物組織材料,包括新鮮或冰凍的材料。

4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D電泳、Western印跡分析以及蛋白活性測(cè)定等下游實(shí)驗(yàn)。

5.一次可以處理100mg左右的樣品,足夠進(jìn)行幾十次SDS-PAGE mini膠電泳檢測(cè)。

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

Western轉(zhuǎn)移緩沖液(5×),PVDF

500ml


使用方法:

使用前,最好請(qǐng)?jiān)谌芤?/span>A中加入自備的1M DTT溶液50μL。

一:勻漿法

?注意:對(duì)致密的實(shí)體組織(如肌肉),最好用Polytron 式勻漿機(jī)勻漿處理。

1. 稱取動(dòng)物或植物組織樣品100mg,剪刀剪成黃豆大小,轉(zhuǎn)移到10-15mL的塑料離心管中。

2. 加入1ml溶液A,在冰上用Polytron 式勻漿機(jī)勻漿,直到?jīng)]有肉眼可見(jiàn)的組織塊。為了避免產(chǎn)熱,可以分多次勻漿,其間放冰上讓勻漿液冷卻。

3. 將勻漿液全部轉(zhuǎn)移到1.5mL的塑料離心管中。

4. 4℃ 12000 g離心10分鐘,組織殘?jiān)槠瑢⑿纬沙恋怼?/span>

5. 將上清液轉(zhuǎn)移至一新的1.5mL塑料離心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要測(cè)定蛋白濃度,請(qǐng)使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把樣品稀釋10倍后再測(cè)定,否則溶液A中的成分會(huì)影響濃度側(cè)定)。如果要進(jìn)行SDS-PAGE電泳,可取部分到離心管中,加入5×SDS-PAGE上樣緩沖液(終濃度為1×),在沸水中處理5分鐘后立即上樣電泳。

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Western轉(zhuǎn)移緩沖液(5×),PVDFMASP2  甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨肽酶2抗體DL-高苯氨 98%

Matriptase  蛋白裂解酶(一種新的癌因)抗體DL-異亮氨 98%

MBP  髓鞘性蛋白抗體D-異亮氨 98%

CMV/HCMV PP65/HHV5 PP65  巨病PP65/CMV低質(zhì)脂蛋白抗體D-別異亮氨 98%

HCMV  人巨病DL-亮氨 98%

HCMV UL23  人巨病UL23抗體L-叔亮氨 99%

HCMV UL49  人巨病UL49蛋白抗體DL-賴氨 99%

MCP-1/CCL2  單核趨化蛋白1抗體(大、小鼠)D-亮氨 99%
注意事項(xiàng):

1.如果4℃ 12000g離心10分鐘后得到的上清液中還有可見(jiàn)的沉淀,可以將上清轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的離心管中后再4℃ 12000g離心10分鐘,以去除可見(jiàn)的小碎片。

2.植物組織中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代謝產(chǎn)物,如果需要除去植物蛋白樣品中殘存的色素等雜質(zhì),可以在最后得到的上清液中加入5倍體積的冷丙酮或冷甲醇,混勻后-20℃放置1小時(shí)或過(guò)夜,然后4℃,12000rpm離心10min,棄上清后室溫風(fēng)干,然后將樣品溶于自備的后續(xù)實(shí)驗(yàn)緩沖液中即可。經(jīng)過(guò)此純化處理后,部分蛋白質(zhì)可能會(huì)發(fā)生變性,不能再用于活性檢測(cè)。


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