實驗外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建 服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 ? 產(chǎn)品名稱 | 馬皰疹病毒通用PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Equine Herpesvirus(EHV)PCR | 貨號 | HE30959-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。 1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。 5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。 6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。 8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 PCR實驗方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 特點優(yōu)勢: 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。 5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。 十六烷基*基氯化銨/鯨蠟烷*基氯化銨/氯化十六烷基*銨/西曲氯銨/氯化*基十六烷基銨/CTAC 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;100g 十六烷基二甲基乙基溴化銨/乙基(1-十六烷基)二甲基溴化銨/鯨蠟基乙基二甲基溴化銨/EHDAB/CDAB 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) 包裝;25g 十六烷基吡啶鹽酸鹽/Cetyl pyridinium HC1 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;500mg 溴化十六烷基吡啶/十六烷基吡啶基溴/溴化鯨蠟基吡啶/溴代十六烷基吡啶/1-十六烷基吡啶嗡溴化物/溴代鯨蠟基吡啶/溴化十六烷吡啶/Hexadecylpyridinium bromide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 包裝;25ml 氯化十六烷基吡啶/氯代十六烷基吡啶/十六烷基吡啶基氯/氯化鯨蠟基吡啶/N-十六烷基氯化吡啶翁一合物/氯化十六烷吡啶/十六烷基氯化吡啶/十六烷基吡啶氯/Hexadecylpyridinium chloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;5ml 十八烷基*基溴化銨/硬脂基*基溴化銨/溴化正硬脂基*基銨/十八烷基二甲基芐基溴化銨/*基十八烷基溴化銨/表面活性劑1831/溴化*基十八烷基銨/STAB 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;1g 十八烷基*基氯化銨/硬脂基*基氯化銨/乳化劑1831/*基十八烷基氯化銨/氯化十八烷基*烷/STAC/OTAC 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;1g 十四烷基*基溴化銨/溴化十四烷基*基銨/肉豆蔻基*基溴化銨/*基十四烷基溴化銨/N,N,N-*基-1-十四烷基溴化銨/N,N,N-*基-1-十四烷溴化物/替溴銨/TTAB 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) 包裝;5g 十四烷基*基氯化銨/肉豆蔻基*基氯化銨/乳化劑1431/*基十四烷基氯化銨/N,N,N-*基-1-十四烷氯化物/(1-十四烷基)*基氯化銨/TTAC 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(HPLC)(T) 包裝;1g 十二烷基*基氯化銨/月桂基*基氯化銨/氯化十二烷基*基銨/*基十二烷基氯化銨/乳化劑1231/DTAC 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC) 包裝;5g 十二烷基*基溴化銨/溴代十二烷基*銨/*基十二烷基溴化銨/月桂基*基溴化銨/溴化十二烷基*銨/乳化劑1232/溴化-N,N,N-*基-1-十二胺/DTAB 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 包裝;100g 十二烷基硫酸鋰/硫酸單十二烷醇酯鋰鹽/月桂基硫酸鋰/LDS 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 包裝;25g 十二烷基肌氨酸鈉/N-月桂酰肌氨酸鈉/十二烷基肌氨鈉/N-甲基-N-月桂酰甘氨酸鈉/十二酰-N-甲基甘氨酸鈉/月桂酰-N-甲基氨基乙酸鈉/N-十二?;?N-甲基甘氨酸鈉/十二酰肌氨酸鈉/SLS 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 包裝;5g 十二烷基硫酸鈉/月桂基硫酸鈉/月桂醇硫酸鈉/十二烷基硫酸氫鈉/十二醇硫酸鈉/發(fā)泡粉/十二烷基硫酸酯鈉鹽/月桂醇硫酸酯鈉/SDS 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 包裝;1g 十二烷基磺酸鈉/月桂基磺酸鈉/1-十二烷基磺酸鈉鹽/Sodium dodecanesulfonate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 包裝;25g 十二烷基苯磺酸鈉/十二烷基苯磺酸鈉-6/金屬清洗劑YS/四聚基苯磺酸鈉/支鏈烷基苯磺酸鈉/石油苯磺酸鈉/烷基芳基磺酸鈉/Sodium dodecylbenzenesulfonate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) 包裝;5g 十二烷基二甲基乙基溴化銨/十二烷基乙基二甲基溴化銨 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 包裝;100g 馬皰疹病毒通用PCR檢測試劑盒Gluconobacter sp. 中文名稱:葡糖桿菌種屬:Gluconobacter sp.提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:Produces 2-keto-L-gulonic acid from sorbitol (U.S.培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:醋酸菌培養(yǎng)基:葡萄糖100.0g,酵母提取物 10.0 g,CaCO3 20.0g, 瓊脂 15.0 g,蒸餾1.0 L, pH 6.8生長條件:26℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(HPLC) Microsporum gypseum 中文名稱:石膏樣小孢子菌種屬:Microsporum gypseum提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:未知應(yīng)用領(lǐng)域:用于檢測灰黃霉素 - M87培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。生長條件:25-28℃,好氧 純度:>98.0%(HPLC) Clostridium│difficile 中文名稱:艱難梭菌 VPI 10463種屬:Clostridium│difficile提供形式:其他安全等級:3模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0121生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:>98.0%(HPLC) Bifidobacterium pseudolongum 中文名稱:假長雙歧桿菌種屬:Bifidobacterium pseudolongum分離基物:feces of animal提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:改良MRS培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:+0.5%L-半胱氨酸(MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,硫酸鎂 0.2 g,乙酸鈉 5.0 g,檸檬酸三銨 2.0 g,磷酸氫二鉀 2.0 g,硫酸錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。121℃,15min。)生長條件:37℃,厭氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% Photobacterium phosphoreum 中文名稱:明亮發(fā)光桿菌種屬:Photobacterium phosphoreum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:海瓊脂:Yeast extract 10.0 g,Malt extract 4.0 g,Glucose 4.0 g,Agar 15.0 g,Sea water 750.0 ml,Distilled water 250.0 ml,pH 7.5 ,Artificial sea water: ,NaCl 28.13 g,KCl 0.77 g,CaCl22H2O 1.6 g,MgCl2 6H2O 4.8 g,NaHCO3 0.11 g,MgSO47H2O 3.5 g,Distilled water 1.0 L生長條件:20-25℃,兼性厭氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:70 wt. % 正丙醇溶液 Saccharofermentans│acetigenes 中文名稱:產(chǎn)乙酸糖發(fā)酵菌種屬:Saccharofermentans│acetigenes分離基物:廢污泥提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:244生長條件:37℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99% Lactobacillus reuteri 中文名稱:路氏乳桿菌種屬:Lactobacillus reuteri提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,硫酸鎂 0.2 g,乙酸鈉 5.0 g,檸檬酸三銨 2.0 g,磷酸氫二鉀 2.0 g,硫酸錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。121℃,15min。生長條件:37℃,微好氧或厭氧存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:99% Cordyceps millitaris (L. ex Fr.) Link 中文名稱:蛹蟲草(北冬蟲夏草、北蟲草)(斜面)種屬:Cordyceps millitaris (L. ex Fr.) Link提供形式:凍干管,斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究;。、藥用,適合液體發(fā)酵菌絲體。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,磷酸二氫鉀 3g,硫酸鎂 1.5g,葡萄糖 20g,維生素B1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。生長條件:25℃,好氧。生長特性15天長滿斜面,菌絲潔白、濃密、豐厚、菌絲絨毛狀。液體深層發(fā)酵溫度23-25℃,pH值為5.5-7,發(fā)酵周期3-5天。存儲條件:2-8℃冷藏。 純度:99% |