產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。 產(chǎn)品名稱:小腸結腸耶爾森菌PCR檢測試劑盒說明書 規(guī)格:50T 編號:HE32077-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 液標準物質 1mL Alcelephine Herpesvirus 1(AlHV-1狷羚皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒 氯胺靈溶液標準物質 1mL Aleutian Disease Virus(ADV)阿留申病病毒PCR試劑盒 殺蟲畏溶液標準物質 1mL Aleutian Disease Virus(ADV)阿留申病病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 蚜滅多溶液標準物質 1mL Aleutian Disease Virus(ADV)阿留申病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 克螨特溶液標準物質 1mL Allpaahuayo virus(ALLV)奧爾帕瓦約病毒RT-PCR試劑盒 硫線磷溶液標準物質 1mL Allpaahuayo virus(ALLV)奧爾帕瓦約病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 硫磷溶液標準物質 1mL Allpaahuayo virus(ALLV)奧爾帕瓦約病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 伐滅磷溶液標準物質 1mL Alrnaria spp.交鏈孢霉屬通用PCR試劑盒 溶液標準物質 1mL Alrnaria spp.交鏈孢霉屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒 線磷溶液標準物質 1mL Alrnaria spp.交鏈孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 吡菌磷溶液標準物質 1mL Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒RT-PCR試劑盒 二溴磷溶液標準物質 1mL Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 溶液標準物質 1mL Amapari virus(AMAV)阿馬帕里病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 滅菌磷溶液標準物質 1mL Amidostomum anseri鵝裂口線蟲PCR試劑盒 毒壤磷溶液標準物質 1mL Amidostomum anseri鵝裂口線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 2′-脫氧胞苷鹽酸/2′-脫氧胞嘧啶核苷鹽酸/鹽酸-2ˊ-脫氧胞苷/鹽酸胞核嘧啶脫氧核糖核苷/2′-dC•HC1超純,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,3992-42-5RT 5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 中文名稱: 2′-脫氧胞苷鹽酸 其他名稱: 2′-脫氧胞嘧啶核苷鹽酸;鹽酸-2ˊ-脫氧胞苷;鹽酸胞核嘧啶脫氧核糖核苷 英文名稱: 2′-dC•HC1 其他名稱: 2′-Deoxycytidine HC1 產(chǎn)品規(guī)格: 超純,98% 包 裝: 1克/5克/25克 CAS號:3992-42-5 C9H13N3O4•HC1=263.68 級別:Ultra Pure Grade 含量:≥98.0% 水分:≤8.0% 性狀:粉末 用途:生化研究 保存:RT 2′-脫氧胞苷-5′-單磷酸/5ˊ-磷酸脫氧胞苷/5ˊ-磷酸脫氧胞嘧啶核苷/5ˊ-脫氧胞啶酸/胞嘧啶脫氧核糖 5ˊ-磷酸/脫氧胞核嘧啶核苷酸/2'-脫氧胞苷-5'-一磷酸/Dcmp高純,99%250毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1032-65-1保存:-20℃ 1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 中文名稱: 2′-脫氧胞苷-5′-單磷酸 其他中文名稱: 5ˊ-磷酸脫氧胞苷;5ˊ-磷酸脫氧胞嘧啶核苷;5ˊ-脫氧胞啶酸;胞嘧啶脫氧核糖 5ˊ-磷酸;脫氧胞核嘧啶核苷酸;2'-脫氧胞苷-5'-一磷酸 英文名稱: dCMP 其他英文名稱: 2′-Deoxycytidine-5′-Monophospha 產(chǎn)品規(guī)格: 高純,99% 包 裝: 250毫克/1克 CAS號:1032-65-1 C9H14N3O7P=307.20 級別:High purity grade 含量:≥99.0%(HPLC) 吸收值A250/A260:0.80~0.84 吸收值A280/A260:0.96~1.00 小腸結腸耶爾森菌PCR檢測試劑盒說明書G氨基丁B型受體2抗體2-Aminothiazol-4-acetic acid別名: 分子式: C5H6N2O2S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 葡萄糖調節(jié)蛋白78抗體(熱休克蛋白70蛋白5)2-Acetylthiophene別名: 分子式: C6H6OS性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 葡萄糖調節(jié)蛋白94抗體(1R,2S)-2-Ami,2-diphenylethanol別名: 分子式: C14H15NO性狀: Powder純度: 99.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 糖原合酶激酶-3β抗體5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine別名: 分子式: C9H10N2S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 糖原合酶激酶-3β抗體1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole別名: 分子式: C8H12N2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 三磷鳥苷環(huán)水解酶抗體5-Ami,3-dihydro-2H-benzimidazol-2-one別名: 分子式: C7H7N3O性狀: Powder純度: 99.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 促代謝型谷氨受體5抗體Acyclovir別名: 分子式: C8H11N5O3性狀: Powder純度: 99.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 生長調節(jié)致癌基因-1抗體GROa1,2,3,4-trahydro-1-acetylquinoline別名: 分子式: C11H13NO性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: 反應五要素: 參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術原理: DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。 |