公司產(chǎn)品僅用于科研測(cè)定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。 2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑) 產(chǎn)品名稱(chēng):磷酸己糖(葡萄糖)異構(gòu)酶(PHI)試劑盒說(shuō)明書(shū) 規(guī)格:48樣、96樣、 貨號(hào):GOY-016637 檢測(cè)方法:紫外分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類(lèi):呼吸代謝途徑系列 貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月 【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。 產(chǎn)黃青霉比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介11(IL-11)試劑盒 細(xì)纖芽孢桿菌細(xì)胞單胺氧化A型(MAO-A)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合4(IGFBP-4)試劑盒 釀酒酵母組織單胺氧化A型(MAO-A)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合3(IGFBP-3)試劑盒 孟氏假單胞菌體液?jiǎn)伟费趸?/span>A型(MAO-A)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)試劑盒 枯草芽孢桿菌膠原(collagen)代謝檢測(cè)試劑專(zhuān)題大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合2(IGFBP-2)試劑盒 亨氏柄桿菌名稱(chēng)大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)試劑盒 冬蟲(chóng)夏草動(dòng)物組織羥脯氨(hydroxyproline)比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合1(IGFBP-1)試劑盒 產(chǎn)黃青霉體液羥脯氨(HYP)比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)試劑盒 釀酒酵母羥脯氨(HYP)高效液相色譜定量檢測(cè)試劑盒大鼠肝生長(zhǎng)因子(HGF)試劑盒 暗黃紫鏈霉菌?羥脯氨(HYP)終點(diǎn)比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠糖130(gp130)試劑盒 白綠色球形孢囊菌細(xì)胞脯氨肽(prolidase;PLD)紫外比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠生長(zhǎng)激(GH)試劑盒 豇豆慢生根瘤菌組織脯氨肽(prolidase;PLD)紫外比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠粒集落激因子(G-CSF)試劑盒 梭菌體液脯氨肽(prolidase;PLD)紫外比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠中性粒趨化2(NAP-2/CXCL7)試劑盒 枯草芽孢桿菌細(xì)菌脯氨肽(prolidase;PLD)紫外比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠FMS樣酪氨激3(Flt3)試劑盒 節(jié)桿菌細(xì)胞脯氨肽(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法大鼠FMS樣酪氨激3配體(Flt3L)試劑盒 水稻漢納酵母定量檢測(cè)試劑盒大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)試劑盒 需鈉弧菌組織脯氨肽(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)試劑盒 枯草芽孢桿菌定量檢測(cè)試劑盒大鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)試劑盒 禽腦脊髓炎病血液脯氨肽(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法大鼠性成纖維生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)試劑盒 大靈芝定量檢測(cè)試劑盒大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL) 試劑盒 磷酸己糖(葡萄糖)異構(gòu)酶(PHI)試劑盒說(shuō)明書(shū)生長(zhǎng)抑制檢測(cè)試劑盒溶體相關(guān)膜4α抗體 質(zhì)膜H+-ATPase檢測(cè)試劑盒分化相關(guān)基因14抗體 液泡膜H+-ATPase檢測(cè)試劑盒β內(nèi)樣2抗體 液泡膜H+-PPase檢測(cè)試劑盒突觸粘附樣分子4抗體 質(zhì)膜H+-ATPase檢測(cè)試劑盒可溶性半乳糖凝集3結(jié)合抗體 液泡膜H+-ATPase檢測(cè)試劑盒瘦抗體 液泡膜H+-PPase檢測(cè)試劑盒脂酯LPIN1抗體 植物非特異性脂轉(zhuǎn)移檢測(cè)試劑盒G偶聯(lián)受體6抗體
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