產(chǎn)品名稱:總生物堿含量測(cè)定試劑盒說明書 規(guī)格:48樣、96樣、 貨號(hào):GOY-016365 檢測(cè)方法:可見分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類:氧化應(yīng)激系列 公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月 【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
測(cè)定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。 phospho-JAK2(Tyr221) 化酪氨激JAK-2抗體紅生成受體(EPOR)ELISA試劑盒 Jak3 酪氨激JAK-3抗體紅生成(EPO)ELISA試劑盒 Phospho-Jak3 (Tyr785) 化酪氨激JAK-3抗體紅膜(EMP)ELISA試劑盒 Phospho-Jak3 (Tyr980/981) 化酪氨激JAK-3抗體紅激因子(ESF)ELISA試劑盒 JNK1/3 氨基末端激1/3抗體橫紋肌輔肌動(dòng)α(sm Actinin-α)ELISA試劑盒 JNK2 氨基末端激2抗體亨廷頓相關(guān)1(HAP1)ELISA試劑盒 JNK3/MAPK10 氨基末端激3抗體黑瘤衍生亮氨拉鏈額外核因子(MLZE)ELISA試劑盒 Jab1 Jun激活區(qū)域-連接1抗體黑色抗體(MC Ab)ELISA試劑盒 phospho-JNK1/2/3(Thr183/185) 化氨基末端激1/2/3抗體黑色激(MSH)ELISA試劑盒 JNK1/2/3 氨基末端激1/2/3抗體黑色濃縮激(MCH)ELISA試劑盒 JAM1/CD321 連接粘附分子1黑色瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒 p300/KAT3B 轉(zhuǎn)錄接頭EP300抗體黑色瘤相關(guān)抗原D4(MAGED4/MAGED4B)ELISA試劑盒 KCNA5 電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員5抗體黑色瘤活性抑制(MIA)ELISA試劑盒 KCNG4/KV6.3 離子通道G4抗體黑色瘤標(biāo)記物(MART/Melan-A)ELISA試劑盒 KCNA7 電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員7抗體核轉(zhuǎn)錄因子κBp65(NFκBp65)ELISA試劑盒細(xì)胞CASPASE-7表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒10/50 次人主動(dòng)脈內(nèi)皮微小RNA大鼠巨噬炎性3α(MIP-3α/20)ELISA試劑盒, 細(xì)胞CASPASE-7表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒10/50 次人主動(dòng)脈平滑肌微小RNA兔子可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒, CASPASE-7表達(dá)西方雜交分析試劑盒5次人心肌微小RNA抑制β-B(Inhbb)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人 CASPASE-7免疫共沉淀分析試劑盒5次人心肌-成人微小RNA哥倫比亞CNA瓊脂礎(chǔ) CASPASE-7表達(dá)elisa試劑盒25次人心肝成纖維微小RNADL-2-氨丁 細(xì)胞CASPASE-8表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒10/20次人心臟成纖維-成人心室微小RNACBZ-L-天冬 冰凍切片組織TRAIL 表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人心肌成纖維-成人心房微小RNANHS活化瓊脂糖凝膠4FF 石蠟切片組織TRAIL 表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人角膜上皮微小RNA人c-jun ELISA試劑盒, 載玻片細(xì)胞TRAIL 表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人角膜微小RNA人質(zhì)金屬抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒,TIMP-2 ELISA kit 冰凍切片組織TRAIL 表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人視網(wǎng)膜色上皮微小RNA人透明質(zhì)結(jié)合(HABP)ELISA試劑盒,HABP ELISA kit 石蠟切片組織TRAIL 表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次人晶狀體上皮微小RNA人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒,DF-Ab ELISA 細(xì)胞TRAIL 表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒10/50 次人虹膜色上皮微小RNA人鈣調(diào)(CAM)ELISA試劑盒, CAM ELISA 細(xì)胞TRAIL 表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒10/50 次人結(jié)膜成纖維微小RNA人前列F(PGF)ELISA試劑盒,PGF ELISA TRAIL 表達(dá)西方雜交分析試劑盒5次人無色睫狀上皮微小RNA人前列特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒,PSA ELISA TRAIL 免疫共沉淀分析試劑盒5次人小梁網(wǎng)微小RNA人環(huán)加氧2(COX-2)ELISA試劑盒, 總生物堿含量測(cè)定試劑盒說明書檢測(cè)試劑盒ADP核糖基化因子結(jié)合2抗體 可溶程序性死亡分子-1檢測(cè)試劑盒精氨加壓受體2抗體 可溶性鳥環(huán)化檢測(cè)試劑盒凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣ASC抗體 可溶性CD163分子檢測(cè)試劑盒絲狀肌動(dòng)結(jié)合抗體 可溶性CD36檢測(cè)試劑盒抗凝血3抗體 可溶性CD38檢測(cè)試劑盒人血清白單克隆抗體 可溶性CD40配體檢測(cè)試劑盒載脂A4抗體 可溶性CD44V6檢測(cè)試劑盒化Rho鳥交換因子2抗體 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。
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