公司產(chǎn)品僅用于科研測定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑) 產(chǎn)品名稱:抗壞血酸過氧化物酶(APX)試劑盒規(guī)格 規(guī)格:48樣、96樣、 貨號:GOY-016371 檢測方法:紫外分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類:ASA-GSH循環(huán)系列 貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個月 【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。 嘴突凸臍蠕孢細(xì)胞PARP表達(dá)比色法定量檢測試劑盒豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)試劑盒 枯草芽孢桿菌細(xì)胞PARP表達(dá)熒光定量檢測試劑盒大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-1Ⅰ)試劑盒 萊比托游動球菌PARP表達(dá)西方雜交分析試劑盒兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/RLAⅠ)試劑盒 頂孢頭孢霉PARP免疫共沉淀分析試劑盒恒河猴主要組織相容性復(fù)合體(MHC/RhLA)試劑盒 地衣芽孢桿菌PARP表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒人核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒 秦氏蜜環(huán)菌細(xì)胞AKT表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒倉鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒 香菇載玻片細(xì)胞AKT表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒 葡萄座腔菌冰凍切片組織AKT表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒 蘋果雙殼菌石蠟切片組織AKT表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒人apelin 12(AP12)試劑盒 亮白曲霉載玻片細(xì)胞AKT表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒小鼠apelin 12(AP12)試劑盒 雷夫松氏菌冰凍切片組織AKT表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒大鼠apelin 12(AP12)試劑盒 白酒 酒精度石蠟切片組織AKT表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒人克拉拉(CC16)試劑盒 桔綠木霉細(xì)胞AKT表達(dá)比色法定量檢測試劑盒小鼠克拉拉(CC16)試劑盒 線蟲被毛孢細(xì)胞AKT表達(dá)熒光定量檢測試劑盒裸鼠克拉拉(CC16)試劑盒 枯草芽孢桿菌AKT表達(dá)西方雜交分析試劑盒大鼠克拉拉(CC16)試劑盒 紫紅曲霉AKT免疫共沉淀分析試劑盒牛腎上腺(EPI)試劑盒 釀酒酵母AKT表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒人腎上腺(EPI)試劑盒 塔賓曲霉細(xì)胞P38表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒小鼠腎上腺(EPI)試劑盒 釀酒酵母載玻片細(xì)胞P38表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒豬腎上腺(EPI)試劑盒 pAAV-RC2冰凍切片組織P38表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒大鼠腎上腺(EPI)試劑盒 抗壞血酸過氧化物酶(APX)試劑盒規(guī)格膠原凝集11檢測試劑盒谷氨1抗體 促消退介質(zhì)檢測試劑盒G偶聯(lián)受體GPR161抗體 糖異構(gòu)1檢測試劑盒G偶聯(lián)受體GPR180抗體 類白抗體檢測試劑盒G通路抑制物2抗體 酚檢測試劑盒G偶聯(lián)受體GPR177抗體 24-羥基膽固檢測試劑盒G偶聯(lián)受體GPR89A抗體 尿二葡萄糖檢測試劑盒G偶聯(lián)受體GPRSP2抗體 鳥二葡萄糖檢測試劑盒G偶聯(lián)受體GPRC5C抗體
|