產(chǎn)品名稱:細(xì)胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(B-AI)試劑盒品牌 規(guī)格:24樣、48樣、 貨號:GOY-016504 檢測方法:可見分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類:碳水化合物代謝系列 公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個月 【實驗前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮氣吹干裝 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
測定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點: ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。 少根根霉細(xì)胞肌激同工腦型(CK--BB)活性連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒人波形(VIM)試劑盒 北方蜜環(huán)菌組織肌激同工腦型(CK--BB)活性連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒人表面活性D(SP-D)試劑盒 海洋桿菌體液肌激同工腦型(CK--BB)活性連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒人阿拉伯半乳糖(AGPs)試劑盒 副豬嗜血桿菌細(xì)胞肌激同工混合型(CK-MB)活性比色法定量檢測試劑盒人N-乙基-絲氨-天門冬-賴氨-脯氨(AcSDKP)試劑盒 Bacillus subtilis subsp. inaquosorum組織肌激同工混合型(CK-MB)活性比色法定量檢測試劑盒人腦紅(NGB)試劑盒 柱枝雙孢霉體液肌激同工混合型(CK-MB)活性比色法定量檢測試劑盒人的牛血清白殘留檢測試劑盒 細(xì)鏈格孢細(xì)胞肌激同工混合型(CK-MB)活性連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒人β淀粉樣1-40(Aβ1-40)試劑盒 肉桂鏈霉菌組織肌激同工混合型(CK-MB)活性連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒人巨噬炎性2(MIP-2)試劑盒 總狀毛霉體液肌激同工混合型(CK-MB)活性連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒人凝膠原(gelson)試劑盒 福山假絲酵母細(xì)胞PTEN活性定比色法定量檢測試劑盒人踝(talin)試劑盒 玉米黑粉菌組織PTEN活性定比色法定量檢測試劑盒人角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)(AR)試劑盒 豌豆根瘤菌細(xì)胞丙激(PK)總活性比色法定量檢測試劑盒小鼠FMS樣酪氨激3配體(Flt3L)試劑盒 根瘤菌組織丙激(PK)總活性比色法定量檢測試劑盒小鼠糖130(gp130)試劑盒 尖角凸臍蠕孢細(xì)胞果糖激(PHOSPHOFRUCTOKINASE)連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒小鼠間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒 深層大洋芽孢桿菌組織果糖激(PHOSPHOFRUCTOKINASE)連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒小鼠γ干擾(IFN-γ)試劑盒 假單胞菌細(xì)胞己糖激(HEXOKINASE)偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒小鼠胰島樣生長因子2(IGF-2)試劑盒 釀酒酵母組織己糖激(HEXOKINASE)偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒小鼠白介13(IL-13)試劑盒 *禾谷鐮刀菌細(xì)胞甘油二脂激(DAG KINASE)連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒小鼠白介18(IL-18)試劑盒 大腸埃希菌組織甘油二脂激(DAG KINASE)連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1) 試劑盒 羊泰勒蟲(崇信株)細(xì)胞葡萄糖激(glucose kinase)比色法定量檢測試劑盒小鼠粒集落激因子(G-CSF)試劑盒 細(xì)胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(B-AI)試劑盒品牌麥角檢測試劑盒甲型病血凝抗體 姜辣檢測試劑盒甲型病血凝抗體 果聚糖檢測試劑盒整合αVβ5抗體 Na-K-ATP檢測試劑盒干擾調(diào)節(jié)因子1抗體 葡萄糖檢測試劑盒白介6 木質(zhì)檢測試劑盒γ干擾誘導(dǎo)16抗體 類黃葡萄糖轉(zhuǎn)移檢測試劑盒整合αVβ1抗體 氯霉檢測試劑盒白介-20抗體 操作步驟: 實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。
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