產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:透明毛圓線蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格 英文名稱:Trichostrongylus vitrinusPCR 編號:HE31660-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 脫落(高純) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:98%,BR純度:95% 脫落,S誘抗素; 壯芽靈 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:95%,BR純度:≥98% 胃蛋白酶(1:3000) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:1:3000,BR純度:95% 核糖核酶A(sigma) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥50 U/mg,sigma 原裝純度:≥98% S4 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%純度:≥98% 胃蛋白酶(1:12000) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:1:12000,BR純度:≥98% 蛋白酶K(進(jìn)分) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥30units/mg proin,sigma分裝純度:≥97% 蛋白酶K(Sigma) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥30units/mg proin,sigma原裝純度:97% 胰凝乳蛋白酶抑制劑 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:進(jìn)分純度:97% 亮抑蛋白酶肽(進(jìn)口) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥95%,進(jìn)口半鹽純度:95% 胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制劑 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥90%,進(jìn)分純度:≥98% 巖藻糖;L巖藻糖 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥99%,BR純度:≥98% 果膠酶 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:3萬U/g純度:≥98% β淀粉酶(70萬u/ml液體) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,70萬u/ml液體純度:≥98.0% β淀粉酶(酶活5萬粉末) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,酶活5萬,粉末純度:≥97% DNA酶,脫氧核糖核酶Ⅰ 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥2000KU/mg proin,(牛胰)純度:≥97% Relaxin 1 松弛肽/松弛素一抗 * 0.2ml 1Aminohydantoin Hydrochloride Renalase 腎酶一抗 * 0.2ml ACTH (124), human SLC12A3/NCCT 鈉離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白一抗 * 0.2ml Bradykinin VNN1 血管非炎癥分子1一抗 * 0.2ml Bradykinin aceta AXUD1 轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白3一抗(半胱氨和絲氨富含核蛋白1) * 0.2ml αMSH BS69/Adenovirus 5 E1A binding proin 腺病毒5結(jié)合蛋白BS69一抗(骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體相關(guān)分子1) * 0.2ml Endothelin1, human,porcine BTG3 高表達(dá)神經(jīng)上皮蛋白BTG3一抗 * 0.2ml Bombesin BTG4 B細(xì)胞遷移基因4一抗 * 0.2ml VIP, human, porcine, rat; VIP (28 amino acids) 甜瓜蒂 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121178200001 Hyaluronic Acid 蜘蛛香 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121179200001 Ropivacaine base 地黃(生地黃) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121180200402 Ropivacaine base 紅杜仲 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121181200001 Gossypolacetic acid 升麻 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121182200502 Catalase 白花蛇舌草 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121183200402 Tazobactam Acid 瓜蔞皮(栝樓) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121184200502 Tazobactam Acid 瓜蔞皮(雙邊栝樓) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121185200101 βNicotinamide adenine dinucleotide hydra(βNAD) 安息香 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121186200101 βNicotinamide adenine dinucleotide 金錢草 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121187200302 βNADP 姜黃 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121188200502 Guanine HCl 威靈仙 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121189200101 Guanine Sulfa 鉤藤 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121190200402 Adenine hydrochloride 桂枝 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121191200402 Inosine 夏天無 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121192200101 Inosine 鉆山風(fēng) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格: 121193200101 5'AMPNa2 透明毛圓線蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格 細(xì)胞角蛋白14抗體4-Hydroxybenzamide別名: 分子式: C7H7NO2性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 神經(jīng)細(xì)胞NB3特定蛋白抗體(2,4-Dihydroxyphenyl)acetonitrile別名: 4-(Cyanomethyl)-1,3-benzenediol分子式: C8H7NO2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 基葡糖苷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 促胃泌素受體抗體6-Hydroxybenzofuran-2(3H)-one別名: 分子式: C8H6O3性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 并呋喃;中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 因單克隆抗體Iriflophenone 3-C-glucoside別名: 3-Glucosyliriflophenone分子式: C19H20O10性狀: Solid純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 二甲酮;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 2號染色體開放閱讀框72抗體2'-O-Methylperlatolic acid別名: 分子式: C26H34O7性狀: Powder純度: 95.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 縮酚;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 細(xì)胞間粘附分子3抗體4-Hydroxy-3-(3-methyl-2-bunoyl)-5-(3-methyl-2-bunyl)benzoic acid別名: 分子式: C17H20O4性狀: Yellow powder純度: 97.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 染色質(zhì)結(jié)合蛋白Cbx8抗體4-(3,4-Dimethoxyphenyl)-3-bune-1,2-diol別名: 分子式: C12H16O4性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 降鈣素抗體Taxiphyllin別名: 分子式: C14H17NO7性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 殺藻劑;植物毒性;基葡糖苷;中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |