產(chǎn)品名稱:NADP蘋(píng)果酸酶(NADP-ME)試劑盒規(guī)格 規(guī)格:48樣、96樣、 貨號(hào):GOY-016631 檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類:呼吸代謝途徑系列 公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月 【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
測(cè)定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。 暗蓋淡鵝膏菌酵母V型ATP(V type ATPase )活性比色法定量檢測(cè)試劑盒小鼠白介1(IL-1)試劑盒 巨大芽胞桿菌植物V型ATP(V type ATPase )活性比色法定量檢測(cè)試劑盒小鼠白介1β (IL-1β)試劑盒 耐久腸球菌動(dòng)物細(xì)胞線粒體F型ATP(F type ATPase)活性比色法小鼠肌紅(MYO/MB)試劑盒 塔賓曲霉定量檢測(cè)試劑盒小鼠血栓B2(TXB2)試劑盒 分枝節(jié)桿菌動(dòng)物組織線粒體F型ATP(F type ATPase)活性比色法小鼠乙(ACH)試劑盒 淺天青鏈霉菌定量檢測(cè)試劑盒小鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒 Sporosarcina植物葉綠體F型ATP(F type ATPase)活性比色法小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒 盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢定量檢測(cè)試劑盒大鼠活化A受體抗體(ACV-RAb)試劑盒 淺白隱球酵母細(xì)菌F型ATP(F type ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠腦紅(NGB)試劑盒 豌豆根瘤菌酵母F型ATP(F type ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠血小板生成(TPO)試劑盒 棉阿舒囊霉A型ATP(A type ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)試劑盒 Lactobacillus brevis動(dòng)物細(xì)胞總ATP(total ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠Bcl-2相關(guān)X(BAX)試劑盒 檸檬色短小桿菌動(dòng)物組織總ATP(total ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠甘露糖結(jié)合/甘露糖結(jié)合凝集(MBP/MBL)試劑盒 游動(dòng)放線菌*細(xì)菌總ATP(total ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介7(IL-7)試劑盒 格氏嗜鹽堿桿菌酵母總ATP(total ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠絲氨/蘇氨(STK)試劑盒 大腸埃希菌植物總ATP(total ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠抗紅抗體(RBC)試劑盒 中慢生華癸根瘤菌甲羥戊(MEVALONATE)通路分析試劑專題大鼠CD3分子(CD3)試劑盒 黃桿菌名稱大鼠c-Jun氨基末端激(JNK)試劑盒 黑木耳通用性甲羥戊(mevalonate)含量高效液相層析-質(zhì)譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠高鐵血紅(MHB)試劑盒 大孢枝孢菌細(xì)胞甲羥戊(mevalonate)含量高效液相層析-質(zhì)譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠二氧化(DAO)試劑盒 NADP蘋(píng)果酸酶(NADP-ME)試劑盒規(guī)格生物羧化檢測(cè)試劑盒組乙轉(zhuǎn)移PCAF抗體 轉(zhuǎn)羧基檢測(cè)試劑盒化原癌基因c-kit抗體 β--ACP合II檢測(cè)試劑盒化原癌基因c-kit抗體 β--ACP合I檢測(cè)試劑盒離子通道Kv3.1抗體 葡萄糖內(nèi)酯檢測(cè)試劑盒激肽釋放11抗體 羧基轉(zhuǎn)移β亞基檢測(cè)試劑盒k輕鏈抗體 脂檢測(cè)試劑盒絲氨/蘇氨激KIST抗體(激相互作用與白血病相關(guān)基因) β甘露聚糖檢測(cè)試劑盒驅(qū)動(dòng)KIF5A抗體 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。
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