產(chǎn)品名稱:羧酸酯酶(CarE)試劑盒規(guī)格 規(guī)格:48樣、96樣、 貨號(hào):GOY-016667 檢測(cè)方法:可見分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類:脂肪酸系列 公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月 【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
測(cè)定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。 擬卵蓋鵝膏菌細(xì)胞花生四烯(arachidonic acid)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介15(IL-15)試劑盒 釀酒酵母組織花生四烯(arachidonic acid)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介16(IL-16)試劑盒 芽孢桿菌白三烯A4(Leukotriene A4 ;LTA4)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介17(IL-17)試劑盒 大腸埃希氏桿菌白三烯B4(LTB4)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)試劑盒 葉生布勒擔(dān)子酵母白三烯C4(LTC4)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠可溶性E選擇(sE-selectin)試劑盒 枯草芽孢桿菌白三烯D4(LTD4)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)試劑盒 Ensifer adhaerens白三烯E4(LTE4)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠17羥皮質(zhì)類固(17-OHCS)試劑盒 枯草芽孢桿菌5-羥基二十四烯(5-HETE)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠N-乙-β-D-氨基葡萄糖苷(NAG)試劑盒 唐菖蒲伯克霍爾德氏菌12-羥基二十四烯(12-HETE)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠17-類固(17-KS)試劑盒 膠孢15-羥基二十四烯(15-HETE)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)試劑盒 宛氏擬青霉前列腺H2(PGH2)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)試劑盒 釀酒酵母前列腺E2(PGE2)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介3(IL-3)試劑盒 枯草芽胞桿菌6-KETO-PGF1a高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介5(IL-5)試劑盒 釀酒酵母前列腺F2a(PGF2a)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠苗條受體(LR/Ob-R)試劑盒 串珠鐮孢*8-ISO-PGF2a大鼠瘦(LEP)試劑盒 大腸埃希氏菌前列腺D2(PGD2)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白血病抑制因子(LIF)試劑盒 釀酒酵母PGE1大鼠L選擇(L-Selectin/CD62L)試劑盒 霍氏瓶霉PGF1a大鼠單核趨化1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒 釀酒酵母PGB2大鼠單核趨化2(MCP-2/CCL8)試劑盒 漢遜德巴利酵母血栓B2(TXB2)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠單核趨化3(MCP-3/CCL7)試劑盒 羧酸酯酶(CarE)試劑盒規(guī)格髓過氧化物檢測(cè)試劑盒溶菌抗體 草乙檢測(cè)試劑盒蚓激抗體 溶菌檢測(cè)試劑盒瘦抗體 NAD-蘋果檢測(cè)試劑盒瘦受體抗體 賴氨氧化2檢測(cè)試劑盒瘦受體抗體(長(zhǎng)) 賴氨氧化3檢測(cè)試劑盒晚期包膜1抗體 脂肪氧化3檢測(cè)試劑盒富含亮氨樣性核抗體 巨病檢測(cè)試劑盒晚期包膜2B抗體 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。
|