產(chǎn)品名稱:脂氧合酶(LOX)試劑盒說(shuō)明書(shū) 規(guī)格:48樣、96樣、 貨號(hào):GOY-016665 檢測(cè)方法:紫外分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類:脂肪酸系列 公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月 【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
測(cè)定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。 Phospho-PRAS40 (Thr246) 化激AKT底物1抗體Syndecan-1/CD138(SDC1)ELISA試劑盒 X protein (N-Terminus) 乙肝病X抗體(N端)STEAP家族成員4(Steap4)ELISA試劑盒 Profilin 1 前纖維1抗體STEAP家族成員1(Steap1)ELISA試劑盒 X protein (C-Terminus) 抗乙肝病X抗體(C端)Stathmin 1(STMN1)ELISA試劑盒 Profilin 2 前纖維2抗體STAT3抑制分子(PIAS3)ELISA試劑盒 Protein G 重組G抗體SPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合2(SMOC2)ELISA試劑盒 Protein A 重組A抗體SPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合1(SMOC1)ELISA試劑盒 RAM-11 RAM-11抗體SHC轉(zhuǎn)化1(SHC1)ELISA試劑盒 RAMP-1 受體活性修飾1抗體SH2攜帶(SHC/SLP-76)ELISA試劑盒 RACK1 受體激活激C1抗體Salusin Beta(Salusin β)ELISA試劑盒 PRMT1 質(zhì)精氨甲基轉(zhuǎn)移1抗體Salusin Alpha(Salusin α)ELISA試劑盒 PRCP 脯氨羧肽抗體SAALDL復(fù)合物(SAALDL)ELISA試劑盒 PRDX3 過(guò)氧化還原3抗體S100鈣結(jié)合P(S100P)ELISA試劑盒 RRM1 核糖核還原1抗體S100鈣結(jié)合A9/鈣粒B(S100A9)ELISA試劑盒 PRL 泌乳抗體S100鈣結(jié)合A8/鈣粒A(S100A8)ELISA試劑盒人體Cyclin A1因化檢測(cè)試劑盒20次周期依賴性激5(CDK5)重組大鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒, 人體Stat1因化檢測(cè)試劑盒20次周期依賴性激抑制因子2A(CDKN2A)重組大鼠脫氫表雄(DHEA)ELISA試劑盒, 人體ras因化檢測(cè)試劑盒20次蛛受體3(LPHN3)重組大鼠S100B(S-100B)ELISA試劑盒, 人體PR-A因化檢測(cè)試劑盒-貨20次轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)重組大鼠皮質(zhì)/腎上(CORT)ELISA試劑盒, 人體PR-B因化檢測(cè)試劑盒20次轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體Ⅰ(TGFβR1)重組兔組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒, 人體ERβ因化檢測(cè)試劑盒20次轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)(TGFβI)重組鮭魚(yú)補(bǔ)體4 人體SOCS-1因化檢測(cè)試劑盒20次轉(zhuǎn)化因子2β(TRA2β)重組吲哚培養(yǎng) 人體SOCS-3因化檢測(cè)試劑盒20次轉(zhuǎn)狀(TTR)重組卵黃瓊脂礎(chǔ) 加入卵黃,用于厭氧梭狀芽孢桿菌的分離培養(yǎng) 人體hMLH1因化檢測(cè)試劑盒20次轉(zhuǎn)鐵受體2(TFR2)重組M H 肉湯(MHB) 用于抗生敏感試驗(yàn) 人體c-fos因化檢測(cè)試劑盒20次著絲粒B(CENPB)重組氧化型輔Ⅱ 大鼠PGES因化檢測(cè)試劑盒20次著絲粒F(CENPF)重組苦玄參苷IA Picfeltarraenin IA 大鼠COX-1因化檢測(cè)試劑盒20次棕櫚化膜2(MPP2)重組柯諾辛 Corynoxine 小鼠p16因化檢測(cè)試劑盒20次棕櫚化膜6(MPP6)重組人表面活性A(SP-A)ELISA試劑盒, SP-A ELISA kit 大鼠p16因化檢測(cè)試劑盒20次足突(PDCN)重組人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)A(SP-A)ELISA試劑盒,SP-A ELISA kit 小鼠PR因化檢測(cè)試劑盒20次足盂(PCX)重組人氨轉(zhuǎn)氨/谷轉(zhuǎn)氨(ALT/GPT)ELISA試劑盒, ALT/GPT ELISA kit 脂氧合酶(LOX)試劑盒說(shuō)明書(shū)松弛肽;松弛檢測(cè)試劑盒2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框50抗體 性成纖維生長(zhǎng)因子檢測(cè)試劑盒科凱恩氏綜合癥相關(guān)/早衰CSA抗體 性成纖維生長(zhǎng)因子1檢測(cè)試劑盒化角8抗體 髓過(guò)氧化物檢測(cè)試劑盒化角8抗體 髓過(guò)氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)檢測(cè)試劑盒化角18抗體 髓鞘性檢測(cè)試劑盒胞粘2抗體 髓鞘性抗體檢測(cè)試劑盒色CPA6抗體 髓系觸發(fā)受體-1檢測(cè)試劑盒色CYP3A抗體 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。
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